协同刺激分子B7-H1和B7-H3在乳腺癌中表达的临床意义及对乳腺癌细胞生物学特性的影响

摘要

第一部分协同刺激分子B7-H1和B7-H3在乳腺癌中的表达及其临床意义。
　　 目的：检测协同刺激分子B7-H1、B7-H3分子在乳腺癌组织中表达，探讨其与乳腺癌患者临床病理特征之间的关系。
　　 方法：收集乳腺癌手术切除的组织59例，统计患者的病理资料及生存时间；通过免疫组织化学染色方法，分析B7-H1、B7-H3分子在乳腺癌组织中的表达，统计学分析其表达的意义。
　　 结果：研究表明①B7-H1、B7-H3分子异常高表达在乳腺癌细胞上，主要表达在胞浆及胞膜。B7-H1阳性表达率47.45％，B7-H3阳性表达率57.62％。正常组织不表达或低表达B7-H1、B7-H3分子。②乳腺癌组织中B7-H1分子的表达和B7-H3分子的表达呈显著正相关。③统计学分析显示，B7-H1在乳腺癌组织中的表达水平与肿瘤Her-2/neu表达相关（P<0.01），而与其它临床参数无关；B7-H3在乳腺癌组织中的表达水平与患者的肿瘤分期相关（P<0.05），而与其它临床参数无关。④B7-H1、B7-H3在乳腺癌组织中的表达水平和浸润T淋巴细胞的数量之间关系无显著统计学意义。⑤生存分析显示，B7-H1分子在乳腺癌中的表达与患者预后无关，而B7-H3分子的表达与患者的预后密切负相关。联合两个分子的表达分析显示，B7-H1/B7-H3双阳性与双阴性与患者的生存时间密相关，B7-H1、B7-H3双阳性患者的生存时间短于双阴性或单阴性患者，双阴性患者生存时间最长。
　　 结论：协同刺激分子B7-H1、B7-H3分子在乳腺癌组织异常表达，其表达和临床病理特征相关，表明其参与了肿瘤的进展；这两分子的表达正相关，且联合两分子的表达与患者生存时间密切相关，提示检测这两分子对乳腺癌的预后判断有重要的意义，可作为相应的生物指标应用。
　　 第二部分协同刺激分子B7-H1和B7-H3对乳腺癌细胞生物学特性的影响。
　　 目的：探讨协同刺激分子B7-H1和B7-H3在乳腺癌细胞株表达对乳腺癌细胞生长、增殖及凋亡的影响，分析B7-H1信号联合B7-H3信号对肿瘤细胞生物学特性的影响，初步探讨这两分子在肿瘤免疫中涉及的可能机制。
　　 方法：选用天然高表达B7-H1和B7-H3的乳腺癌细胞株MDA-MB-231和天然高表达B7-H3不表达B7-H1的乳腺癌细胞株MDA-MB-435，采用分子和细胞生物学手段，脂质体转基因法构建B7-H1-M435细胞；分别使用计数和流式细胞术分析乳腺癌细胞生长曲线和细胞周期；使用紫杉醇诱导肿瘤细胞凋亡，Annexin-V-PI分析细胞凋亡。
　　 结果：进一步研究表明，①B7-H1+B7-H3+乳腺癌细胞株M231细胞的增殖明显强于各组，转入B7-H1基因的M435/B7-H1细胞的增殖数量较M435细胞和M435/mock细胞显著提高。②同时细胞周期检测显示，B7-H1+B7-H3+的M435/B7-H1和M231细胞进入S期的比例明显高于B7-H3+的M435细胞和M435/mock细胞。③在紫杉醇的诱导下，M435/mock细胞的凋亡率为18.7％，M435/B7-H1细胞的凋亡率为9.6％，而M231细胞的凋亡率为5.8％。
　　 结论：结果显示，B7-H1信号可以协同B7-H3信号促进乳腺癌细胞增殖，并进入S期。B7-H1+B7-H3+的M43.5/B7-H1和M231细胞能够部分抵抗紫杉醇诱导的细胞凋亡，表明B7-H1信号和B7-H3信号的协同作用能够部分抑制紫杉醇诱导的凋亡。表明这两分子在肿瘤中的异常表达促进了肿瘤的生长和抵抗凋亡能力，对肿瘤的进展发挥重要作用，并对肿瘤化疗药物的筛选提供新的依据。
　　 综上所述，B7-H1和B7-H3分子在肿瘤细胞中的异常表达对肿瘤的发生和进展起着重要的作用，B7-H1协同B7-H3信号可促进肿瘤细胞的增殖及抗调亡，检测这两个分子在乳腺癌中的表达对乳腺癌的诊断和预后有着重要意义。这为寻找有效的乳腺癌诊断指标，设计特异分子靶向治疗乳腺癌提供了新的理论依据。