多发性骨髓瘤患者4-1BBL分子表达及功能的研究:自体造血干细胞移植治疗多发性骨髓瘤27例疗效分析

摘要

第一部分多发性骨髓瘤患者表达4-1BBL分子及功能的研究
　　 [目的]
　　 (1)研究多发性骨髓瘤(MM)细胞表面4-1BBL分子的表达情况。
　　 (2)探讨4-1BBL逆向信号对人多发性骨髓瘤细胞株U266的促生长作用及其机制。
　　 [方法]
　　 (1)采用免疫荧光标记和流式细胞术检测骨髓瘤细胞表面4-1BBL分子的表达；
　　 (2)采用抗人4-1BBL单克隆抗体1F1激发4-1BBL逆向信号，细胞计数及MTT法观察U266细胞的增殖；
　　 (3)碘化丙锭单染法，检测1F1作用后细胞周期各期分布比例的变化；
　　 (4)采用细胞内细胞因子染色法，检测1F1作用后U266细胞合成白细胞介素-6（IL-6）的改变；
　　 (5)利用中和性抗体阻断IL-6的生物学作用，观察IL-6是否参与了4-1BBL逆向信号对U266细胞的促增殖作用；
　　 (6)采用MTT法检测硼替佐米对1F1促U266细胞增殖作用的影响。
　　 [结果]
　　 (1)20例MM患者细胞表面均组成性高表达4-1BBL分子，人多发性骨髓瘤细胞株（U266、OPM-2、MY-5、KMS-11、LP-1）均组成性高表达4-1BBL分子；
　　 (2)1F1激发U266细胞表面4-1BBL逆向信号后，细胞计数及MTT实验均表明单抗1F1明显促进U266细胞系生长；
　　 (3)U266细胞周期各期分布比例发生变化，G1期细胞减少，S期细胞增多，表明单抗1F1促进U266细胞从G1期向S期转换；
　　 (4)细胞内细胞因子染色示1F1促进U266自分泌IL-6增多；
　　 (5)中和IL-6能够抑制单抗1F1对U266细胞的促增殖作用；
　　 (6)硼替佐米能够抑制单抗1F1对U266细胞的促增殖作用。
　　 [结论]
　　 MM患者原代细胞及细胞株表面均组成性高表达4-1BBL分子；4-1BBL逆向信号通过增加IL-6的产生，促进U266细胞的增殖；硼替佐米能够抑制单抗IF1对U266细胞促增殖作用；4-1BB/4-1BBL分子可能是对MM进行免疫干预的重要靶点。
　　 第二部分自体造血干细胞移植治疗多发性骨髓瘤27例疗效分析
　　 [目的]
　　 评价自体造血干细胞移植(ASCT)治疗MM的疗效以及影响其疗效的因素。
　　 [方法]
　　 回顾性分析自2004年5月至2011年8月间在我院接受ASCT治疗的27例MM患者的临床资料，并与同期获得良好部分缓解(VGPR)或以上缓解而未接受ASCT的28例患者进行比较，分析ASCT对缓解程度、无进展生存(PFS)和总生存(OS)时间的影响以及ASCT后患者的相关预后因素。
　　 [结果]
　　 所有患者移植后造血均顺利重建，无移植相关死亡。移植后完全缓解(CR)率由移植前的25.9％提高到70.4%(P＜0.01)。ASCT组、非ASCT组预期4年PFS率分别为(64.9±11.1)%（未达中位PFS时间）和(26.9±11.7)%（中位PFS时间为20个月）(P＜0.05)。ASCT组、非ASCT组预期5年OS率分别为(52.2±15.7)%（未达中位OS时间）和(33.1+24.2)%（中位OS时间为60个月）(P＞0.05)。ASCT组相关预后因素分析发现移植后是否接受维持／巩固治疗与PFS(P=0.01)及OS(P＜0.01)密切相关；接受以硼替佐米为主的方案诱导治疗，缓解后早期行自体移植，并接受维持治疗的患者至随访结束时均无进展生存(P=0.01)。
　　 [结论]
　　 ASCT可以进一步提高患者的CR率，延长PFS，并可能会延长OS。新型靶向药物加入移植前后的诱导及巩固／维持治疗可优化ASCT，对改善MM患者的预后具有重要意义。