Lumican在大肠癌中表达、临床意义及与E-cadherin、MMP-7相关性的研究

摘要

目的：①通过免疫组化S-P法和RT-qPCR方法检测Lumican在人大肠癌中的表达；②研究Lumican与上皮粘附分子E-cadherin、基质降解酶MMP-7表达的相关性，初步探讨Lumican在大肠癌中的表达、临床意义及其与大肠癌发生、发展及浸润、转移的关系。
　　方法：收集64例大肠癌组织及其对应的37例癌旁组织、远离癌的27例正常大肠组织蜡块。①应用免疫组化 S-P法检测上述同一组织内 Lumican、E-cadherin及MMP-7蛋白表达；②分别提取27例新鲜大肠癌组织及远离肿瘤的正常大肠组织RNA，应用荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR)技术检测Lumican mRNA相对表达量；③结合Lumican表达的临床意义，就其与相应同一组织内E-cadherin、MMP-7表达相关性行统计学分析。统计学分析采用SPSS19.0软件。
　　结果：①免疫组化显示Lumican蛋白阳性染色定位于胞膜，癌细胞过表达，癌旁成纤维细胞亦有表达，正常大肠上皮细胞不表达。64例大肠癌、37例癌旁组织Lumican阳性表达率分别为73.44%（47/64）、67.57%（25/37），差异无统计学意义（P>0.05）。27例正常大肠组织无一例表达Lumican，表达率为0%（0/27），显著低于癌组织、癌旁组织表达，差异有统计学意义（P<0.001）。大肠癌组织Lumican蛋白表达与患者性别、年龄、发病部位无关，而与病理分化程度、Dukes分期、淋巴结是否转移相关；分化越差，Dukes分期越晚，伴淋巴结转移，Lumican表达越高，差异均有统计学意义（P<0.001）。② E-cadherin阳性染色定位在上皮细胞-细胞接触侧细胞膜上；MMP-7主要表达在胞质，部分胞膜染色，间质不染或浅染。大肠癌组织E-cadherin、MMP-7阳性表达率分别为34.38%（22/64）、68.75（44/64），两者表达呈负相关（r=－0.648），有统计学意义（P<0.01）。③ Lumican mRNA在大肠癌组织中表达高于远离肿瘤的正常组织表达（P<0.001）。同一大肠癌组织免疫组化检测Lumican蛋白量与RT-qPCR检测Lumican mRNA相对表达量呈正相关（r=0.123），但无统计学意义（P>0.05）。④Lumican表达与E-cadherin表达呈负相关（r=－0.570），Lumican与MMP-7表达呈正相关（r=0.701），均有统计学意义（P<0.01）。
　　结论：①大肠癌组织中Lumican mRNA和蛋白均较正常大肠组织表达升高，大肠癌组织Lumican mRNA升高引起翻译生成的Lumican蛋白表达增多。Lumican蛋白表达与大肠癌组织学分级、Dukes分期及淋巴结是否转移有关。②大肠癌中E-cadherin和 MMP-7表达与组织学分级、Dukes分期及淋巴结是否转移密切相关， E-cadherin低表达与 MMP-7高表达在大肠癌的侵袭和转移过程中可能有一定的协同作用。③Lumican蛋白表达与E-cadherin呈负相关，而与MMP-7呈正相关。联合检测Lumican、E-cadherin及MMP-7可作为评价大肠癌恶性生物学行为指标。

目录

封面

中文摘要

英文摘要

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前言

材料与方法

一、实验材料

二、实验方法与步骤

三、统计方法

结果

一、免疫组织化学结果

二、RT-PCR法检测大肠癌中Lumican基因表达结果

三、大肠癌组织Lumican免疫组化结果与RT-PCR结果的相关性

讨论

结论

小结与展望

参考文献

综述

参考文献

中英文缩略词表

攻读学位期间公开发表的论文

附录

致谢