COX-2抑制剂塞来昔布对胶质细胞OLN93及胶质瘤细胞U373放射增敏效应的初步研究

摘要

目的：
　　通过对比塞来昔布在正常脑胶质细胞及恶性脑胶质瘤细胞中的不同作用，观察其对正常胶质细胞OLN93及恶性胶质瘤细胞U373的放射增敏效应，并初步探讨其作用机制。
　　方法：
　　选择正常人脑胶质细胞OLN93和恶性人脑胶质瘤细胞U373作为研究对象，分别以不同浓度塞来昔布（0μM、10μM、20μM、40μM、60μM、80μM）设立药物组（D组、D′组），并以不同剂量6MV-X线照射（0Gy、0.5Gy、1Gy、2Gy、4Gy、6Gy、8Gy）设立放射组（R组、R′组），二者交互设立药物＋放射组（D＋R组、D′＋R′组），观察塞来昔布影响后的细胞形态学变化，并分别行MTT实验检测细胞生长抑制率，细胞划痕实验检测细胞迁移能力，克隆形成实验绘制细胞存活曲线、流式细胞仪技术检测细胞周期时相分布。
　　结果：
　　1．细胞形态学观察显示：加入不同浓度塞来昔布作用24h后， OLN93细胞和U373细胞的细胞形态均发生相应变化，且药物浓度越大，细胞形态变化越明显。
　　2．MTT实验结果显示：塞来昔布对OLN93细胞和U373细胞均有一定的生长抑制作用，呈浓度依赖性，且对U373细胞的生长抑制作用更明显。
　　3．细胞划痕实验结果显示：40μM的塞来昔布处理OLN93细胞和U373细胞划痕24h后，两种细胞的迁移能力均减弱，且对U373细胞的迁移抑制作用更明显。
　　4．细胞克隆实验结果显示：40μM塞来昔布不增加OLN93细胞的放射敏感性，其放射增敏比SER为1.04；而增加U373细胞的放射敏感性，其放射增敏比SER为1.27。
　　5．流式细胞仪实验结果显示：
　　（1）塞来昔布不影响OLN93细胞的细胞周期分布（C、D组的G0/G1期、S期、G2/M期细胞比例无明显变化，其差别均无统计学意义，P>0.05）；而增加U373细胞的 G2/M期细胞比例（C′、D′组的 G2/M期细胞比例分别为27.29±3.22和35.05±0.97，其差别有统计学意义，P<0.05）。
　　（2）射线可增加OLN93细胞的G2/M期细胞比例（C、R组的G2/M期细胞比例分别为24.04±0.50和36.56±1.64，其差别有统计学意义，P<0.05）；射线可增加U373细胞的 G2/M期细胞比例（C′、R′组的 G2/M期细胞比例分别为27.29±3.22和39.11±1.62，其差别有统计学意义，P<0.05）。
　　（3）塞来昔布不诱导射线增加OLN93细胞的G2/M期细胞比例（R、D+R组的G2/M期细胞比例分别为36.56±1.64和34.93±1.31，其差别无统计学意义，P>0.05）；塞来昔布诱导射线增加 U373细胞的 G2/M期细胞比例（R′、D′＋R′组的 G2/M期细胞比例分别为39.11±1.62和44.16±2.23，其差别有统计学意义，P<0.05）。
　　结论：
　　1．塞来昔布在体外实验中对正常胶质细胞OLN93及恶性胶质瘤细胞U373均有生长抑制及迁移抑制作用，呈浓度依赖性。
　　2．塞来昔布在体外实验中对正常胶质细胞OLN93无放射增敏作用；而对恶性胶质瘤细胞U373具有放射增敏效应。
　　3．塞来昔布调控恶性胶质瘤细胞周期分布，诱导增加 G2/M期的细胞比例，可能是其放射增敏机制之一。
　　4．选择性COX-2抑制剂塞来昔布有望成为理想放射增敏剂在临床上广泛使用。

目录

封面

中文摘要

英文摘要

目录

序 言

材料和方法

一．主要实验材料和仪器设备

二．主要试剂配制

三．实验方法

结 果

一．细胞形态学观察

二．塞来昔布对细胞的体外生长抑制效应

三．细胞划痕实验

四．细胞克隆形成曲线

五．塞来昔布联合放射后对细胞周期的影响

讨 论

结 论

参考文献

综 述

缩略词表

攻读学位期间公开发表的论文

致谢