探讨HECW1基因突变及其蛋白表达异常在诊治泌尿系肿瘤中的临床价值

摘要

目的：将第二代测序技术发现并筛选出的膀胱癌突变基因HECW1作为致病候选基因，利用Sanger测序技术对膀胱癌、肾癌及前列腺癌中的肿瘤组织进行 HECW1基因突变检测，并通过免疫组织化学法研究膀胱癌、肾癌及前列腺癌中HECW1蛋白表达，结合临床病理资料，探索HECW1蛋白表达在诊治泌尿系肿瘤中的临床价值。
　　方法：
　　第一部分：取2013年6月至2014年12月本院手术治疗的膀胱移行细胞癌患者癌组织93例，并取其中20例患者的癌旁组织作为对照；取2014年1月至12月本院手术治疗的肾透明细胞癌患者癌组织25例，并取相应癌旁组织25例作为对照；取2013年12月至2014年12月本院手术治疗的前列腺癌患者癌组织18例，并取相应癌旁组织18例作为对照。将所取组织制作成蜡块，运用OMEGA试剂盒法提取癌组织及癌旁组织中基因组DNA，并通过聚合酶链反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）扩增HECW1第二代测序突变位点附近区域DNA片段，运用Sanger测序技术对扩增DNA片段进行测序，分析HECW1基因突变情况。
　　第二部分：取第一部分所制造蜡块，应用免疫组织化学法研究膀胱癌及癌旁组织、肾癌及癌旁组织和前列腺癌及癌旁组织中HECW1蛋白表达情况，并总结相关临床病理资料，分析HECW1蛋白表达情况与各临床病理特征间的关系。
　　结果：
　　第一部分：（1）93例膀胱癌组织中，发现1例HECW1基因突变，包含2处点突变，且均为错义突变，该病例相应癌旁组织中未发现突变，追溯该患者原发及第一次复发手术术后病理蜡块测序均未见突变；剩余92例膀胱癌组织和19例癌旁组织中均未发现突变。（2）25例肾癌组织及25例相应癌旁组织中均未发现突变。（3）18例前列腺癌组织及18例相应癌旁组织中均未发现突变。
　　第二部分：（1）膀胱癌组织和癌旁组织HECW1蛋白阳性率分别为64.52％（60/93）和15.00%（3/20），两者之间差异有统计学意义（P<0.05）；肿瘤直径>3cm组和肿瘤直径≤3cm组阳性率分别为84.38%（27/32）和54.10%（33/61），两者之间差异有统计学意义（P<0.05）；复发组和原发组阳性率分别为87.50%（21/24）和56.52%（39/69），两者之间差异有统计学意义（P<0.05）；肌层浸润组和非肌层浸润组阳性率分别为85.42%（41/48）和42.22%（19/45），两者之间差异有统计学意义（P<0.05）。HECW1蛋白的不同表达水平与年龄、性别、肿瘤数目和病理分级之间的差异无统计学意义（P>0.05）。（2）肾癌组织和癌旁组织HECW1蛋白阳性率分别为60.00%（15/25）和84.00%（21/25），两者之间差异无统计学意义（P>0.05）。HECW1蛋白的不同表达水平与年龄、性别和临床分期之间的差异无统计学意义（P>0.05）。（3）前列腺癌组织和癌旁组织HECW1蛋白阳性率分别为83.33%（15/18）和33.33%（6/18），两者之间差异有统计学意义（P<0.05）。HECW1蛋白的不同表达水平与年龄、组织分化程度和病理分期之间的差异无统计学意义（P>0.05）。
　　结论：
　　（1）HECW1蛋白在膀胱癌组织中的表达高于癌旁组织，HECW1蛋白的不同表达水平与膀胱癌肿瘤大小、发病频率及浸润程度之间有一定的相关性；HECW1蛋白在前列腺癌组织中的表达高于癌旁组织。
　　（2）HECW1蛋白表达异常与泌尿系肿瘤的发生有一定的相关性，需要进一步研究其功能及作用机制。
　　（3）HECW1基因在膀胱癌中的突变比例较低，需要增加检测基因突变测序覆盖区域。

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前言

参考文献

第一部分 应用Sanger测序技术检测在膀胱癌、肾癌、前列腺癌的癌及癌旁组织中HECW1基因突变

引言

材料与方法

结果

讨论

参考文献

第二部分 研究HECW1蛋白表达在膀胱癌、肾癌、前列腺癌中的临床意义

引言

材料与方法

结果

讨论

参考文献

小结

不足与展望

综述: Nedd4蛋白家族与肿瘤的相关性研究进展

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攻读学位期间公开发表的论文

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