大鼠甲醇中毒后视网膜电图反应与αB晶状体蛋白、ALDH2和ATP5A1表达变化的相关性

摘要

目的：研究甲醇中毒后αB晶状体蛋白、ALDH2和ATP5A1在视网膜、玻璃体液中的表达以及视网膜电图反应（electroretinogram, ERG）的变化规律，初步探索两者之间的关联性。
　　方法：将SD大鼠分为对照组（A组）、中毒3天组（B组）和中毒7天组（C组）。于相应时间点分别记录视网膜电图反应，利用色谱法检测心血中甲醇、甲酸浓度以及组织中的甲酸浓度。通过 Western blot方法验证αB晶状体蛋白、ALDH2和ATP5A1在视网膜、玻璃体中的表达。
　　结果：①ERG的视杆反应，B组的a波和b波振幅分别下降至对照组的53％和37%（p<0.05），C组仅b波振幅约下降至对照组的48%（p<0.05）。最大混合反应，B组的a波和b波振幅分别下降至对照组的53%和40%（p<0.05），C组仅b波振幅约下降至对照组的44%（p<0.05），B组a波的潜伏期延迟了26%（p<0.05），C组仅a波潜伏期延迟了28%（p<0.05）。振荡电位反应，B组和C组的总振幅分别下降至对照组的53%和57%（p<0.05），总时程分别延迟15%和60%（p<0.05），与对照组相比，B组的OS1、OS3、OS4和OS5以及C组的OS3、OS4、和OS5的波幅均降低(p<0.05)，且B组和C组之间OS1之间的差异具有统计学意义（p<0.05）。与对照组相比，B组的峰间隔IPI1和C组的IPI1-4均增宽（p<0.05），而且C组的IPI1-4比B组增宽的更为明显（p<0.05）。视锥反应，B组a波和b波的振幅分别下降至对照组的53%和40%（p<0.05），C组仅b波的振幅下降至对照组的69%（p<0.05），B组和C组之间b波振幅的差异具有统计学意义（p<0.05），C组a波和b波潜伏期分别延迟了29%和9%（p<0.05）。②在中毒组，B组的甲醇血浓度为1.0 mg/mL，而C组甲醇血浓度低于顶空气相色谱仪检测阈值；B组的甲酸血浓度为0.61mg/mL，C组甲酸浓度接近B组，为0.60mg/mL，与B组比较，C组脑和胃组织内的甲酸浓度有增加的趋势，而肝和肾组织中的甲酸浓度反而有下降趋势。③在视网膜和玻璃体混合物中，甲醇中毒组αB晶状体蛋白、ALDH2和ATP5A1的表达量较对照组有增加趋势，且C组的表达量的上调更明显。相对于对照组，B组视网膜组织内未检测到明显的αB晶状体蛋白表达量，ALDH2和ATP5A1的表达没有发现明显的改变；在C组，视网膜组织内的αB晶状体蛋白、ALDH2和ATP5A1的表达均呈现下调的现象。在玻璃体液内，B组αB晶状体蛋白的表达改变不是很明显，但C组αB晶状体蛋白发生上调；在中毒组玻璃体液内ALDH2和ATP5A1的表达均发生上调，且C组玻璃体液内的ALDH2和ATP5A1高表达现象较B组更为明显。
　　结论：大鼠甲醇中毒后ERG损害明显，且中毒7天组的损害比3天组更为严重，可能与其代谢产物甲酸的蓄积作用有关。相较于视网膜，玻璃体液内αB晶状体蛋白、ALDH2和 ATP5A1表达的变化更适宜作为甲醇中毒视网膜毒性的生物学标志。甲醇中毒后视网膜功能改变与甲酸的蓄积以及αB晶状体蛋白、ALDH2和ATP5A1表达变化之间可能存在潜在的关联，值得进一步探索。

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引言

1 理论与实践基础

2 研究进展

3 研究目的

4 研究意义

5 本研究的创新性

第一部分 大鼠甲醇中毒后视网膜电图反应的变化

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

4 小结

第二部分 甲醇及其代谢产物甲酸浓度的检测

一、血液中甲醇浓度的检测

二、血液及组织中甲酸浓度的检测

第三部分 αB晶状体蛋白、ALDH2和ATP5A1在视网膜和玻璃体中的表达

1 材料与方法

2 实验结果

3 讨论

4 小结

结论

参考文献

综述: αB晶状体蛋白在视网膜及眼外组织器官中表达及作用机制的研究进展

缩略词

攻读学位期间本人出版或公开发表的论著、论文

致谢