老年人CD71+CD235a+有核红细胞免疫功能特点及机制研究

摘要

目的：有核红细胞具有免疫负性调控的作用。近来有实验表明新生儿脾脏和脐带血中的有核红细胞具有强大的免疫抑制作用。但是老年人外周血有核红细胞在增龄过程中是否发生变化及变化特点如何尚不清楚。本实验拟以青年人为对照，探讨老年人CD71+CD235a+有核红细胞的免疫功能特点及可能涉及的机制。
　　方法：1.分别取健康老年人及青年人外周血，通过流式细胞仪测定各组 CD71+CD235a+有核红细胞占外周血单个核细胞（PBMC）的比例。2.通过流式分选法分选获得各组有核红细胞，磁珠分选法获得 T细胞，T细胞增殖实验分3组进行:老年组：老年有核红细胞+经 CFSE染色的 T细胞；青年组：青年人有核红细胞+经CFSE染色的T细胞；对照组：经CFSE染色的 T细胞。3.实时荧光定量 PCR法比较青年组及老年组有核红细胞表达免疫抑制性细胞因子的差异。
　　结果：1.老年人有核红细胞占 PBMC比例高于青年人（9.93?2.95％vs1.96?1.16%,t=3.37,P<0.001）2.老年组有核红细胞能显著抑制T细胞的增殖（t=2.91,P＜0.05），而青年组并没有这一现象（t=0.387，p>0.05）。3.与青年组相比，老年组有核红细胞能分泌更多量的 Arg-2（t=9.04,P<0.01），IL-1β，IL-6和TGF-β(t=4.51,5.46,6.92,p<0.05)，
　　结论:老年人外周血有核红细胞占外周血单个核细胞比例较青年人高；老年人外周血的有核红细胞可能通过释放更多量的Arg-2，IL-1β，IL-6和TGF-β来抑制T细胞的增殖，从而发挥免疫抑制的作用。

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引言

参考文献

材料和方法

一．材料：

1.各组外周血取自苏州大学附属第一医院检验科

2.实验试剂：

3.主要仪器设备：

4．引物：均由lnvitrogen公司合成。

二．实验方法：

1.外周血PBMC的制备

2.流式细胞术：

3.各组有核红细胞的制备：

4. T 细胞的制备：

5. T细胞的CFSE染色：

6. T细胞增殖实验

7.实时荧光定量PCR：

8.统计学方法：

结果

一、老龄组和青年组有核红细胞占PBMC比例

二.T细胞增殖实验结果

三、PCR法测各组有核红细胞细胞因子释放情况

讨论

结论

参考文献

综述:有核红细胞的免疫学功能研究进展

攻读学位期间公开发表和待发表的论文

致谢