血游离核酸Alu序列在卵巢癌诊断及随访中临床价值的实验研究

摘要

本文主要从以下几个部分展开论述：
　　第一部分：探讨Alu水平和完整性指数在卵巢癌早期诊断中的意义。
　　目的:
　　检测血清中ccfDNA在卵巢癌患者、卵巢良性肿瘤患者和正常人中的含量，并计算完整性指数，探讨Alu水平和完整性指数在卵巢癌早期诊断中的意义。
　　方法:
　　采用实时荧光定量PCR方法检测24例卵巢癌、12例卵巢良性肿瘤，12例正常对照组血清中游离的Alu-219和Alu-115的水平。
　　结果:
　　①血清Alu-219片段含量和Alu完整性指数在卵巢癌组较卵巢良性肿瘤组和正常组明显升高(p=0.023，p=0.004)，有统计学差异。Alu-219和Alu完整性指数的ROC曲线下面积的P值分别是0.006、0.002，说明以Alu-219和完整性指数用于诊断卵巢癌有显著意义。
　　②利用Alu-219、Alu完整性指数和CA-125的cut off值诊断卵巢癌和卵巢良性囊肿的符合率分别是0.79(19/24)、0.96(23/24)、0.83(20/24)，完整性指数的诊断符合率高于CA-125，说明Alu完整性指数也可用于卵巢良性肿瘤和正常人的鉴别诊断。
　　结论:
　　Alu-219和完整性指数有望在将来单独或与其他肿瘤标志物联合应用于卵巢癌的早期诊断，以及与卵巢良性病变的鉴别诊断。
　　第二部分：探讨Alu水平和完整性指数在卵巢癌早期诊断中的意义。
　　目的:
　　检测血清中ccfDNA在卵巢上皮性癌患者术前、术后化疗后3月、术后化疗后6月的含量，探讨它们与卵巢上皮性癌临床分期、病理学分型和病情监测的关系。
　　方法:
　　采用实时荧光定量PCR方法检测26例卵巢上皮性癌和24例正常对照组血清中游离的Alu-219和Alu-115的水平。
　　结果:
　　①有腹膜后淋巴结转移或脉管转移者的血浆Alu完整性指数(0.58±0.07)较无转移者(0.46±0.12)明显升高(P=0.025)。
　　②手术化疗后6个月，卵巢上皮性癌患者的血浆Alu-219含量(11.79±9.99)基本恢复到正常人水平(7.55±5.43)，两者相比无差异(P=0.087)。
　　③手术化疗后6个月，卵巢上皮性癌患者的血浆Alu完整性指数(0.41±0.17)较手术前(0.49±0.12)下降(p=0.050)，基本恢复到正常水平（与正常相比P=0.714）。
　　④将正常对照完整性95％可信区间上限为界值，将卵巢上皮性癌患者分为高血浆Alu完整性指数组和低完整性指数组，根据Log Rank(Mantel-Cox)统计法，高血浆Alu完整性指数组的累积生存率明显低于低血浆Alu完整性指数组，两组累积生存率有差异(P=0.037)。
　　结论:
　　Alu-219和Alu-完整性指数可以用于评估卵巢上皮性癌是否发生远处转移和术后病情的监测。

目录

声明

摘要

研究背景

参考文献

第一部分 Alu-qPCR的实验方法评价

参考文献

第二部分 Alu序列与卵巢癌早期诊断的研究

前言

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

第三部分 Alu序列与上皮性卵巢癌术后随访监测的研究

前言

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

综述 Clinical Applications of Circulating DNA

攻读博士学位期间科研成果

中英文缩略词表

致谢