延髓头端腹内侧区下行5-HT系统参与调节6-OHDA诱导的帕金森大鼠模型的痛敏反应

摘要

目的：研究延髓头端腹内侧区（RVM）下行5-HT系统在6-OHDA诱导的帕金森大鼠模型痛觉过敏中的作用及其机制。
　　方法：应用脑立体定位法在SD大鼠双侧黑质致密部微量注射6-羟基多巴胺（6-OHDA）建立双侧黑质损毁的帕金森病（PD）大鼠模型。造模两周后，运用转棒实验检测大鼠的运动功能。运用辐射热缩腿法和von Frey法检测大鼠热痛阈和机械痛阈。造模四周后，RVM内分别显微注射西酞普兰、5,7-DHT或鞘内注射西酞普兰，运用热辐射缩腿法和Von frey法检测在给药后不同时间点的热痛阈和机械痛阈。运用western blotting检测纹状体中酪氨酸蛋白酶（TH）。运用免疫荧光检查测中脑黑质多巴胺神经元数量，RVM内5-HT神经元、γ-氨基丁酸能神经元、u阿片受体阳性神经元神经元及凋亡细胞数量以及腰段脊髓背角侧5-HT神经纤维密度。运用微透析对大鼠RVM进行采样并用高效液相检测胞外5-HT和5-HT代谢物5-HIAA含量。运用高效液相检测腰段脊髓中5-HT和5-HT代谢物5-HIAA含量。运用荧光金逆标法检测RVM内是否有神经元投射到中脑黑质。
　　结果：1.与假手术组比较，6-OHDA模型大鼠中脑黑质致密部多巴胺神经元数量减少，纹状体中TH蛋白表达显著降低；从造模后第二周开始在转棒实验中的在棒时间显著减少；且在痛阈检测中其热痛阈在造模后两周和四周时显著降低，机械痛阈在造模后四周时显著降低。2.免疫荧光检测发现6-OHDA模型大鼠RVM区5-HT神经元的数目显著减少,而γ-氨基丁酸能神经元、u阿片受体阳性神经元神经元及凋亡细胞的数目没有统计学差异。运用微透析检测6-OHDA模型大鼠RVM区胞外5-HT及和5-HT代谢物5-HIAA含量发现其均显著降低。3.免疫荧光检测发现脊髓腰段背角侧5-HT能神经纤维密度显著减少。运用高效液相检测脊髓中的5-HT递质含量发现其显著降低。4.在RVM显微注射西酞普兰后第三天，6-OHDA大鼠模型降低的热痛阈得到了明显逆转，而机械痛阈没有出现差异性改变。在RVM显微注射5,7-DHT后第九天，6-OHDA大鼠模型降低的热痛阈和机械痛阈都得到了显著逆转。在鞘内给予西酞普兰三小时后，6-OHDA大鼠模型降低的热痛阈得到了明显逆转；而其降低的机械痛阈在给药后12小时得到了明显逆转。5.荧光金逆标结果显示正常大鼠RVM内有细胞投射到中脑黑质，但这些细胞和5-HT神经元不共定位。
　　结论：延髓头端腹内侧区下行5-HT系统可能参与了6-OHDA诱导的帕金森大鼠模型痛敏反应的发生。

目录

声明

引言

材料与方法

1 实验材料

2 实验方法

结果

1.6-OHDA诱导的PD大鼠模型的热痛阈和机械痛阈是降低的

2.6-OHDA诱导的PD大鼠模型中缝核5-HT系统受损

3.6-OHDA诱导的PD大鼠模型腰段脊髓背角5-HT递质水平降低

4.给予西酞普兰可以缓解6-OHDA诱导的PD大鼠模型痛敏反应

5.RVM内显微注射5,7-DHT可以部分缓解痛觉过敏

6.投射到黑质致密部的RVM神经元不是5-HT能神经元

讨论

参考文献

综述:帕金森病相关疼痛发生机制研究进展

中英文对照缩略词表

攻读学位期间公开发表的论文及科研成果

致谢