脑源性神经营养因子BDNF对大鼠三叉神经元T-型钙通道电流作用及机制研究

摘要

目的：研究脑源性神经营养因子BDNF（brain derived neurotrophic factor；BDNF）对大鼠三叉神经节（Trigeminal ganglion，TG）神经元上T-型钙通道电流的作用和机制。
　　方法：应用免疫印迹方法检测大鼠三叉神经节上TrkB受体的表达，应用免疫荧光检测TrkB受体和Cav3.2的共定位和分布。应用全细胞膜片钳技术，研究BDNF对大鼠小直径TG神经元T-型钙通道电流及兴奋性的作用，并应用药理学方法研究其信号通路作用机制。
　　结果：本实验研究发现：
　　1）在分子水平上，免疫印迹结果显示大鼠三叉神经节上有TrkB受体的表达，免疫荧光结果显示TrkB受体在小直径TG神经元上与Cav3.2共表达；
　　2）在电生理研究结果显示，BDNF能增加TG神经元上T-型钙通道电流，并且呈现剂量依赖性。50ng/mL BDNF对T-型钙通道电流的增加率约为30.24％；
　　3）在药理学研究中，TrkB FC嵌合体能够翻转BDNF对T-型钙通道的增加作用，而GDP-β-S（特异性G蛋白活性抑制剂）却不能翻转。BDNF对T-型钙通道的增加作用能被蛋白激酶A（PKA）的选择性阻断剂PKI6-22和KT5720，磷脂酰肌醇激酶（PI3K）的选择性阻断剂LY294002，蛋白激酶B（AKT）的选择性阻断剂MK2206所阻断。而蛋白激酶C（PKC）的选择性阻断剂GF109203X不能阻断BDNF的作用。4）BDNF显著增加小直径三叉神经节细胞的放电频率，此作用可被NiCl2阻断。
　　结论：BDNF增大大鼠小直径TG神经元的T-型钙电流呈剂量依赖性。这个增大作用是通过TrkB受体后激活PKA以及PI3K/AKT途径起效的。BDNF能够增加TG神经元兴奋性。

目录

声明

引言

材料和方法

一．实验材料：

二．实验方法：

结果

一．TrkB在大鼠小直径TG神经元中表达

二．BDNF剂量依赖性增大了大鼠小直径TG神经元T-型钙电流

三．BDNF对大鼠小直径TG神经元T-型钙电流动力学的影响

四．BDNF增大大鼠小直径TG神经元T-型钙电流的分子机制

五．BDNF对大鼠小直径TG神经元兴奋性的影响

讨论

一、TrkB受体介导了BDNF对TG神经元T-型钙电流的增大作用

二、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）和蛋白激酶A信号通路参与BDNF对T-型钙通道的调节作用

三、BDNF通过调控T-型钙通道来增加三叉神经节神经元的兴奋性

结论

参考文献

综述：脑源性神经营养因子及其受体在疼痛中的研究进展

攻读硕士期间公开发表的论文

缩略词表

致谢