聚合物囊泡纳米药物用于小鼠原位肿瘤的靶向治疗

摘要

聚合物囊泡作为纳米药物载体面临着许多挑战，如血液循环不够稳定、细胞选择性差、摄取率低、药物释放慢、材料不可生物降解或制备繁琐等，至今仍没有囊泡纳米药物进入临床试验。为解决这些问题，我们设计了GE11多肽修饰的还原响应可逆交联的生物可降解聚合物囊泡纳米药物用于 EGFR过表达的小鼠原位肝癌和结直肠癌的靶向治疗。
　　本研究设计合成了聚乙二醇-b-聚（三亚甲基碳酸酯-co-1,2-二硫戊环-三亚甲基碳酸酯）（ PEG-P(TMC-DTC)）和偶联 GE11的GE11-PEG-P(TMC-DTC)，二者自组装形成双硫交联的囊泡。通过 pH梯度法可高效装载DOX·HCl得到囊泡纳米药物GE11-PS-DOX。采用DLS、TEM、MTT试验、流式细胞仪和CLSM等手段研究了GE11-PS-DOX的理化性质、稳定性、还原响应性、细胞毒性和靶向性。我们发现其粒径小、生理环境下稳定，在模拟细胞内还原环境下药物快速释放。在 EGFR高表达的 SMMC-7721肝癌细胞中，含10％GE11的GE11-PS-DOX能最明显靶向性的抑制肿瘤细胞生长，证明了其通过受体介导内吞作用进入细胞。在小鼠体内研究GE11-PS-DOX的循环时间、活体成像、生物分布以及肿瘤治疗中，发现其循环时间长，半衰期为8.27小时，在荷皮下SMMC-7721肿瘤小鼠中肿瘤富集量为13%ID/g，是非靶向组的2倍，在原位肝癌小鼠肝肿瘤中的富集同样也很显著。令人兴奋的是，GE11-PS-DOX在荷原位 SMMC-7721肝癌小鼠中无明显毒副作用，显著延长了原位肝癌小鼠的生存期，并有50%小鼠的肝部肿瘤完全消退。将盐酸伊立替康（CPT-11）装载到相同囊泡中，得到GE11-PS-CPT纳米囊泡药物用于EGFR过表达的结直肠癌的治疗。我们系统表征了GE11-PS-CPT理化性质、细胞和活体层面的抗肿瘤活性，结果显示不同GE11表面密度修饰的囊泡纳米药物对不同结肠癌细胞的影响虽有差异，但是对人源HCT-116细胞和鼠源CMT-93细胞均有较好的靶向作用。在荷原位CMT-93直肠多倍体癌小鼠治疗的初步研究中， GE11-PS-CPT在给药期间和给药结束2周内的肿瘤抑制效果强。基于GE11-PS的囊泡纳米药物具有设计简单且多功能、无毒、长循环、肿瘤高富集、肿瘤细胞内药物释放快和强抑制肿瘤生长的优点，是一种非常有应用潜力的纳米药物。

目录

声明

第一章 文献综述

1.1 引言

1.2 聚合物囊泡的概述

1.3 生物可降解聚合物囊泡

1.4 循环稳定的聚合物囊泡

1.5刺激响应性聚合物囊泡

1.6 具有不对称膜结构的聚合物囊泡

1.7靶向聚合物囊泡

1.8 本论文的设计

参考文献

第二章EGFR靶向多功能囊泡阿霉素能选择性抑制小鼠体内人原位肝癌的生长

2.1 引言

2.2 实验部分

2.3 结果与讨论

2.4 本章小结

参考文献

第三章 GE11多肽修饰的囊泡伊立替康纳米药物用于小鼠体内结直肠癌的靶向治疗

3.1 引言

3.2 实验部分

3.3 结果与讨论

3.4 本章小结

参考文献

第四章 结论与展望

4.1 结论

4.2 展望

附录 英文缩写对照

攻读硕士期间本人出版或公开发表的论文、专利

致谢