百合知母汤与围绝经期综合征肾虚证方证相应关系的基础研究

摘要

本研究分为三部分：
　　 第一章：百合知母汤对去势型围绝经期综合征肾虚证大鼠的影响
　　 一、对大鼠体重、饮水量、摄食量及体温的影响
　　 目的：观察百合知母汤(BHZMT)对去势型围绝经期综合征肾虚证大鼠体重、饮水量、摄食量及体温的影响。方法：采用去势雌性3月龄SD大鼠，随机分为：去势组、去势+BHZMT组、去势+短程HVB组、去势+短程HVB+BHZMT组、去势+TX组、去势+TX+BHZMT组、去势+长程HVB组、去势+长程HVB+BHZMT组、去势+ADE组、去势+ADE+BHZMT组，另设一假手术对照组共11组，分别造模后，各组连续ig.2周，分别于给药后每周测量一次体重、体温，每天同一时间测定饮水量、摄食量，动态观察围绝经期综合征肾虚证大鼠的演变及BHZMT的防治作用。结论：BHZMT对TX致肾阴虚证模型和ADE致肾阳虚证模型的症状具有一定的改善作用。
　　 二、对大鼠血浆cAMP和cGMP水平的影响
　　 目的：观察BHZMT对去势型围绝经期综合征肾虚证大鼠血浆cAMP和cGMP水平的影响。方法：采用去势雌性3月龄SD大鼠，随机分为：去势组、去势+BHZMT组、去势+短程HVB组、去势+短程HVB+BHZMT组、去势+TX组、去势+TX+BHZMT组、去势+长程HVB组、去势+长程HVB+BHZMT组、去势+ADE组、去势+ADE+BHZMT组，另设一假手术对照组共11组，分别造模后，各组连续ig.2周后测定血浆中cAMP和cGMP水平，观察去势型围绝经期综合征肾虚证大鼠植物神经系统功能的变化。结论：BHZMT可能通过调节植物神经系统功能而产生一定的滋阴作用。
　　 三、对大鼠血清E2水平和子宫系数的影响
　　 目的：观察BHZMT对去势型围绝经期综合征肾虚证大鼠血清E2水平和子宫系数的影响。方法：采用去势雌性3月龄SD大鼠，随机分为：去势组、去势+BHZMT组、去势+短程HVB组、去势+短程HVB+BHZMT组、去势+TX组、去势+TX+BHZMT组、去势+长程HVB组、去势+长程HVB+BHZMT组、去势+ADE组、去势+ADE+BHZMT组，另设一假手术对照组共11组，分别造模，各组连续ig.2周后测定血清E2水平，并计算其子宫系数，观察BHZMT对去势型围绝经期综合征肾虚证大鼠体内雌激素水平和子宫的影响。结论：BHZMT对围绝经期综合征的治疗作用可能需要卵巢的参与。
　　 第二章：百合知母汤对自然衰老型围绝经期综合征肾虚证大鼠的影响
　　 一、对大鼠体重、饮水量、摄食量、体温及心率的影响
　　 目的：观察BHZMT对自然衰老型围绝经期综合征肾虚证大鼠体重、饮水量、摄食量、体温及心率的影响。方法：采用自然衰老雌性15～16月龄SD大鼠，随机分为：围绝经期组、围绝经期+BHZMT组、围绝经期+TX组、围绝经期+TX+BHZMT组、围绝经期+ADE组、围绝经期+ADE+BHZMT组，另设一青年对照组共7组，分别造模1周后，各组连续灌胃给予BHZMT3周，分别于造模后每周测量一次体重、体温，每天同一时间测定饮水量、摄食量，于末次给药后次日用心电图机测定心率，动态观察围绝经期综合征肾虚证大鼠的演变及BHZMT的防治作用。结论：BHZMT对围绝经期综合征肾阴虚证大鼠的症状具有一定的改善作用。
　　 二、对大鼠血浆cAMP、cGMP水平的影响
　　 目的：观察BHZMT对自然衰老型围绝经期综合征肾虚证大鼠血浆cAMP、cGMP水平的影响。方法：采用自然衰老雌性15～16月龄SD大鼠，随机分为：围绝经期组、围绝经期+BHZMT组、围绝经期+TX组、围绝经期+TX+BHZMT组、围绝经期+ADE组、围绝经期+ADE+BHZMT组，另设一青年对照组共7组，分别造模1周后，各组连续灌胃给予BHZMT3周后测定血浆中cAMP和cGMP水平，观察自然衰老型围绝经期综合征肾虚证大鼠植物神经系统功能的变化。结论：BHZMT对围绝经期肾阴虚组大鼠的植物神经系统有一定的调节作用。
　　 三、对大鼠血清E2水平、卵巢和子宫系数的影响
　　 目的：观察BHZMT对自然衰老型围绝经期综合征肾虚证大鼠血清E2水平和脏器系数的影响。方法：采用自然衰老雌性15～16月龄SD大鼠，随机分为：围绝经期组、围绝经期+BHZMT组、围绝经期+TX组、围绝经期+TX+BHZMT组、围绝经期+ADE组、围绝经期+ADE+BHZMT组，另设一青年对照组共7组，分别造模1周后，各组连续灌胃给予BHZMT3周后测定血清E2水平，于末次给药后次日脱颈椎处死大鼠，称取卵巢、子宫重量，计算脏器系数，观察自然衰老型围绝经期综合征肾虚证大鼠雌激素水平和生殖器官的变化。结论：BHZMT对围绝经期和围绝经期肾阴虚证大鼠生殖系统有一定的改善作用。
　　 四、对大鼠下丘脑NE、DA、5-HT含量的影响
　　 目的：观察BHZMT对自然衰老型围绝经期综合征肾虚证大鼠下丘脑内单胺类神经递质NE、DA、5-HT含量的影响。方法：采用自然衰老雌性15～16月龄SD大鼠，随机分为：围绝经期组、围绝经期+BHZMT组、围绝经期+TX组、围绝经期+TX+BHZMT组、围绝经期+ADE组、围绝经期+ADE+BHZMT组，另设一青年对照组共7组，分别造模1周后，各组连续灌胃给予BHZMT3周。于末次给药次日，脱颈椎处死大鼠，迅速分离下丘脑，并采用高效液相色谱——电化学方法测定下丘脑单胺类神经递质NE、DA、5-HT的含量。结果：围绝经期大鼠NE水平下降，DA、5-HT水平明显升高。围绝经期肾阴虚证大鼠NE、DA、5-HT水平明显升高。围绝经期肾阳虚证大鼠5-HT水平明显升高。BHZMT能降低肾阴虚大鼠下丘脑NE、DA、5-HT的含量(P<0.01)：升高肾阳虚大鼠下丘脑NE、DA含量，降低5-HT水平，但无显著性差异。结论：BHZMT可有效调节围绝经期肾阴虚大鼠中枢神经递质水平。
　　 五、对大鼠下丘脑P物质和β-内啡肽含量的影响
　　 目的：观察百合知母汤对自然衰老型围绝经期综合征肾虚证大鼠下丘脑内P物质和β-内啡肽含量的影响。方法：采用自然衰老雌性15～16月龄SD大鼠，随机分为：围绝经期组、围绝经期+BHZMT组、围绝经期+TX组、围绝经期+TX+BHZMT组、围绝经期+ADE组、围绝经期+ADE+BHZMT组，另设一青年对照组共7组，分别造模1周后，各组连续灌胃给予BHZMT3周。于末次给药次日，脱颈椎处死大鼠，迅速分离下丘脑，并采用免疫组化方法测定下丘脑单胺类神经递质P物质和β-内啡肽的含量。结论：BHZMT可有效调节围绝经期综合征肾阴虚证大鼠下丘脑内P物质和β-内啡肽的含量。
　　 六、对大鼠卵巢组织形态的影响
　　 目的：观察百合知母汤对自然衰老型围绝经期综合征肾虚证大鼠卵巢组织形态变化的影响。方法：采用自然衰老雌性15～16月龄SD大鼠，随机分为：围绝经期组、围绝经期+BHZMT组、围绝经期+TX组、围绝经期+TX+BHZMT组、围绝经期+ADE组、围绝经期+ADE+BHZMT组，另设一青年对照组共7组，分别造模1周后，各组连续灌胃给予BHZMT3周。于末次给药次日，大鼠处死，取卵巢置10％福尔马林固定，做组织形态检查。结论：BHZMT可改善围绝经期和围绝经期肾阴虚证大鼠的卵巢组织形态学变化。
　　 第三章：百合知母汤对大鼠卵巢颗粒细胞的影响
　　 一、幼年期、成年期及围绝经期大鼠卵巢颗粒细胞生长情况
　　 目的：观察幼年期、成年期和围绝经期大鼠卵巢颗粒细胞(GC)的生长情况。方法：分别取23d、3月龄和12月月龄大鼠各5只，23d鼠于取细胞前48h皮下注射PMSG66U/只，分别取GC计数，于37℃、5％CO2培养箱中继续培养，连续观察10天内GC的生长情况。结论：23d注射PMSG大鼠的GC数量多、活性好，适合用于观察药物的作用。
　　 二、不同浓度CdCl2对卵巢颗粒细胞的影响
　　 目的：观察不同浓度的CdCl2对大鼠卵巢颗粒细胞(GC)的影响。方法：加入的CdCl2终浓度分别为0uM、10uM、20uM、40uM、60uM、80uM，37℃、5％CO2培养48h后，采用MTT比色法于酶联免疫测定仪490nm波长处测定OD值。结论：高浓度的CdCl2对GC具有损伤作用，根据CdCl2对GC的时效、量效关系，我们选择了40uM浓度的CdCl2为最适合的细胞刺激浓度。
　　 三、百合知母汤对CdCl2致卵巢颗粒细胞损伤的保护作用
　　 目的：观察BHZMT对CdCl2致GC损伤的保护作用。方法：体外培养GC，培养72h后在96孔板内分别加入40uMCdCl2刺激液，加入大鼠含药血清，使其终浓度为20％、10％、5％、2.5％和1.25％，同时设对照组：(1)10％DMEM培养液组；(2)空白血清组；(3)含40uMCdCl2组；(4)不合刺激因素的上述含药血清。继续培养48h后，采用MTT比色法测定OD值。结论：BHZMT含药血清能抑制CdCl2对大鼠GC的损伤，具有保护细胞的作用。

目录

文摘

英文文摘

前言

论文说明：英文缩写词（Abbreviation）

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作者简介

第一章百合知母汤对去势型围绝经期综合征肾虚证大鼠的影响

一、对大鼠体重、饮水量、摄食量及体温的影响

二、对大鼠血浆cAMP和cGMP水平的影响

三、对大鼠血清E2水平和子宫系数的影响

小结

参考文献

第二章 百合知母汤对自然衰老型围绝经期综合征肾虚证大鼠的影响

一、对大鼠体重、饮水量、摄食量、体温及心率的影响

二、对大鼠血浆cAMP、cGMP水平的影响

三、对大鼠血清E2水平、卵巢和子宫系数的影响

四、对大鼠下丘脑NE、DA、5-HT含量的影响

五、对大鼠下丘脑P物质和β-内啡肽含量的影响

六、对大鼠卵巢组织形态的影响

小结

参考文献

第三章百合知母汤对大鼠卵巢颗粒细胞的影响

一、幼年期、成年期、围绝经期大鼠卵巢颗粒细胞的生长情况

二、不同浓度CdCl2对卵巢颗粒细胞的影响

三、百合知母汤对CdCl2致卵巢颗粒细胞损伤的保护作用

小结

参考文献

第四章综述 围绝经期综合征辩证论治及模型学研究

致谢