槲皮素、没食子酸对SMMC-7721肝癌细胞PI3K/AKT信号通路影响的探讨

摘要

研究目的：
　　 探讨国医大师经验方“抗癌扶正方”中泽漆的单体槲皮素、没食子酸在抗肝癌、促进细胞凋亡方面的作用机制。
　　 研究方法：
　　 体外培养肝癌细胞SMMC-7721，顺铂为阳性组，观察不同浓度槲皮素、没食子酸对细胞凋亡的作用及其相关机制。采用MTT法检测槲皮素、没食子酸对细胞生长的影响，并观察在不同时间点的细胞形态；利用流式细胞仪检测药物作用后的细胞凋亡情况及细胞周期分布；运用RT-PCR及WesternBlot法检测单体对SMMC-7721细胞PI3K/AKT信号通路相关凋亡蛋白表达的影响。
　　 研究结果：
　　 槲皮素、没食子酸对人肝癌细胞SMMC-7721增殖有明显抑制作用，呈浓度依赖性和时间依赖性。流式结果提示，槲皮素可将SMMC-7721细胞周期阻滞于G0/G1期，并且其凋亡率随浓度增加而逐渐增加；没食子酸可使SMMC-7721细胞周期阻滞于G0/G1期，凋亡率随药物浓度增加的上升趋势不显著。细胞形态观察，药物组细胞呈现不规则形，甚至变圆，体积缩小，细胞结构没有对照组紧密，某些细胞甚至出现脱落、漂浮现象。RT-PCR、WesternBlot凋亡相关蛋白表达检测表明，药物组AKT的表达受抑制，PTEN、Caspase9蛋白的表达率随着药物浓度的增加而增加。
　　 研究结论：
　　 槲皮素、没食子酸均能诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡，其机制可能是使细胞周期阻滞于G0/G1期，PTEN的过表达抑制AKT活化，激活Caspase9从而促进细胞凋亡。PI3K/AKT信号通路的表达，可能是槲皮素、没食子酸诱导肝癌细胞SMMC-7721凋亡的机制之一。