泰山磐石散对多囊卵巢综合征大鼠妊娠模型卵巢VEGF的表达、血清TNF-α及妊娠结局的影响

摘要

目的:观察泰山磐石散对PCOS妊娠大鼠胚泡着床结局的影响，从卵巢血管内皮生长因子的分布和变化及血清肿瘤坏死因子的水平，分析多囊卵巢综合征的生理病理基础，以及妊娠丢失的机理，探讨中药对PCOS妊娠丢失的改善作用。
　　方法:应用21日龄雌性SD大鼠90只随机分为两组，70只为模型组，20只为空白对照组。23日龄起模型组大鼠每日皮下注射DHEA6mg/100g体重+0.2mL注射用大豆油30天，空白对照组大鼠同期颈背部皮下注射0.2mL注射用大豆油30日。80日龄PCOS模型组大鼠用克罗米酚灌胃连续5天促排;然后与雄鼠按1∶1合笼，次日以发现阴栓者记为妊娠d1天。PCOS促排妊娠组分为三组，PCOS模型促排中药组在妊娠d1天加用中药（泰山磐石散）;PCOS模型促排西药组在妊娠d1天加用地屈孕酮;PCOS促排妊娠组在妊娠d1天予以0.2ml生理盐水/d灌胃，均灌至处死前。通过监测肿瘤坏死因子TNF-α的水平，卵巢内血管内皮生长因子的分布状况及空间变化，妊娠大鼠胚泡着床数的统计，探讨促排卵药及中药泰山磐石散对PCOS模型大鼠体内细胞因子水平及妊娠结局的影响，并进行统计分析。
　　结果:1 TNF-α在正常妊娠组及模型妊娠组血清中的表达:
　　PCOS生理盐水妊娠组血清TNF-α水平较正常妊娠对照组、PCOS中药妊娠组及PCOS西药妊娠组血清TNF-α水平明显偏高(P＜0.05)，PCOS中药妊娠组及PCOS西药妊娠组血清TNF-α水平与正常妊娠对照组之间无明显差异。
　　2.大鼠卵巢组织VEGF的分布变化:
　　2.1PCOS模型生理盐水妊娠组VEGF在卵巢窦前卵泡、发育良好的小窦状卵泡中的颗粒细胞、黄体颗粒细胞、间质细胞的表达强度均显著高于正常妊娠对照组(P＜0.05)。
　　2.2PCOS中药妊娠组和PCOS西药妊娠组卵巢内VEGF在卵巢窦前卵泡及小窦状卵泡中的颗粒细胞、黄体颗粒细胞、间质细胞的表达强度稍高于正常妊娠对照组，但差距不明显(P＞0.05)。
　　2.3各组（包括正常妊娠对照组及PCOS造模妊娠组）免疫组化均显示妊娠d8天VEGF的表达强度明显高于妊娠d1天和妊娠d5天。
　　2.4正常妊娠对照组和PCOS模型妊娠组卵巢内VEGF在妊娠期大窦状卵泡中几乎不表达;
　　3.大鼠子宫胚泡着床数的统计
　　PCOS中药妊娠组及PCOS西药妊娠组比PCOS生理盐水妊娠组胚泡着床数高，但模型组虽经中药及西药进行保胎治疗，胚泡着床数仍较正常妊娠组略低，
　　结论:1、VEGF在卵巢中大窦状卵泡中表达减弱可能是导致妊娠期不排卵的一个因素.VEGF可能参与大鼠妊娠早期黄体血管的新生，且可能对妊娠中期血管的功能维持起支持作用。
　　2、TNF-α参与多囊卵巢的生理和病理机制，TNF-α的异常高表达与妊娠流产相关。
　　3、泰山磐石散能够降低VEGF在卵巢细胞颗粒细胞及间质细胞的表达强度，降低PCOS模型组大鼠血清TNF-α浓度水平，提高胚泡着床数。

目录

声明

摘要

前言

第一部分 理论研究

一、祖国医学对多囊卵巢综合征的认识

1、多囊卵巢综合征的病因病机

2、多囊卵巢综合征的中医治疗

二、现代医学对多囊卵巢综合征的研究进展

1、PCOS的病因病机

2、PCOS的西医治疗

3、PCOS的远期并发症

三、肿瘤坏死因子在多囊卵巢综合征中的研究进展

1．TNF-α与PCOS的关系

2．TNF-α与胚胎着床

四、血管内皮生长因子在多囊卵巢综合征中的研究进展

1．VEGF的异常表达与PCOS

2．VEGF与胚胎着床

第二部分 中药对多囊卵巢综合征大鼠妊娠模型的实验研究

一、实验材料

1．实验动物和药物

2．动物模型建立与分组

3．实验方案及给药方法

4．标本的制备保存

5．指标测定

6．数据的统计学处理

二、实验结果

1．造模前后大鼠体重的比较

2．大鼠阴道脱落细胞涂片观察

3．造模效果评价

4．大鼠血清TNF-α水平的分析比较

5．大鼠卵巢组织VEGF的分布变化比较

6．大鼠子宫胚泡着床数的统计

第三部分 讨论

一、多囊卵巢综合征动物模型的建立

二、多囊卵巢综合征与妊娠丢失

三、泰山磐石散治疗本病作用机制的探讨

参考文献

附录

攻读硕士学位期间取得的学术成果

致谢