电针合募穴调节肠功能与肠运动神经元的关系研究

摘要

目的:基于肠功能异常的便秘动物模型，探究针刺肠的合穴、募穴、合募穴调节肠功能的效应差异，观察电针干预前后肠神经抑制性运动神经元的变化情况，分析电针不同穴位调节肠功能效应差异与肠抑制性运动神经元的关系，为临床合理选取腧穴治疗肠腑病症提供参考。
　　方法:Sprague-Dawley雄性大鼠4周龄110只，随机分为正常组20只，造模组90只，在造模14天期间给予造模组0-4℃冰水灌胃，并观察大鼠粪便的湿重、干重、首粒排便时间与小肠推进功能。造模结束后第15天，挑选造模成功的大鼠随机分为模型组12只，电针干预三组（电针募穴、电针合穴、电针合募穴组各6只），电针强度1.5mA，电针频率2/15HZ，每只大鼠电针干预15min/天，电针期间观察大鼠粪便的湿重、干重、首粒排便时间进行比较分析，于实验周期第22天将正常组、模型组与电针三组大鼠结肠组织取材并固定，以免疫组化测定近端结肠与远端结肠肌间神经丛nNOS阳性反应神经元平均光密度，进行半定量分析。
　　结果:(1)在造模期间，模型组大鼠粪便湿重、干重均减少，粪便湿重在第2，8，12，14天较正常组比较降低(p＜0.05)，粪便干重在第10，12，14天低于正常组(p＜0.05)，首粒排便时间低于正常组(p＜0.05)。
　　(2)在电针干预期间，电针三组穴位均能够使粪便湿重向正常水平恢复，电针合募穴优于电针募穴与电针合穴(p＜0.05)。电针三组穴位均有使粪便干重向正常水平恢复的作用。电针三组穴位对首粒排便时间均有改善，电针募穴有使结肠功能向正常水平恢复的趋势，但并不能够使其恢复至正常水平，电针募穴对结肠功能的改善弱于电针合穴与电针合募穴。
　　(3)在近端结肠肌间神经丛，模型组nNOS阳性神经元显著高于正常组(p＜0.01)。电针干预治疗后，三组穴位电针治疗均能使便秘大鼠近端结肠肌间神经丛异常升高的nNOS明显降低(p＜0.01)，且电针合穴与电针合募穴均能够nNOS恢复到正常水平，而电针募穴没有出现这一现象，且电针募穴与电针合募穴比较差异有统计学意义(p＜0.01)。
　　(4)在远端结肠肌间神经丛，模型组nNOS明显高于正常组(p＜0.01)，电针三组穴位均能使异常升高的nNOS降低(p＜0.01)，且电针合穴与电针合募穴能够使nNOS恢复至正常水平，但电针募穴并不能使其恢复至正常水平(p＜0.01)，综上说明远端结肠肌间神经丛nNOS在电针合穴、电针合募穴调节便秘大鼠肠功能中的作用更加明显。
　　结论:(1)本实验再次验证了冰水灌胃复制便秘模型大鼠的可行性与优点，即该造模方法能够使得整个实验周期简短，更易于操作。近、远端结肠肌间神经丛抑制性神经元nNOS的异常升高是导致便秘发生的局部神经机制之一。
　　(2)电针合穴、募穴及合募穴均能有效改善肠功能，使肠功能向正常水平恢复。本研究显示在便秘状态下，两集元穴的配穴作用大于单穴的效应。电针合募穴对便秘大鼠结肠运动的促进作用，可能骶副交感神经更容易被激活从而产生更优的效应，才会使得两集元穴的配伍效应加强。
　　(3)电针募穴调节近、远端结肠肌间神经丛抑制性神经元nNOS的作用较弱，电针合募穴的作用最优。电针合募穴调节肠功能的效应存在差异，近、远端神经肌间神经丛神经元nNOS的的不同改变可能是基础。

目录

声明

摘要

前言

第一部分 文献研究

1．中医学对肠功能运动认识

1．1 中医对肠生理功能的认识

1．2 中医对肠病理状态及便秘的认识

1．3 中医理论对针刺特定穴位调节肠运动功能的指导

2．现代医学对肠道结构及功能的认识与研究现状

2．1 现代医学对肠解剖结构的认识

2．2 现代医学对肠神经系统的认识和研究

3．针刺对肠功能及肠神经系统影响的研究

3．1 针刺特定穴对肠运动调节的研究现状

3．2 针刺调节肠神经系统的研究

4．结语

第二部分 实验研究

1．实验材料

1．1 实验动物

1．2 实验器材

1．3 实验试剂

1．4 实验配备溶液

2．实验方法

2．1 实验分组

2．2 造模方法

2．3 测定指标

2．4 电针干预方法

2．5 结肠组织取材

2．6 免疫组化前期准备

2．7 免疫组织化学法

2．8 读片

2．9 统计学处理方法

3．实验结果

3．1 粪便重量

3．2 小肠推进功能

3．3 首粒排便时间

3．4 近端结肠nNOS阳性反应神经元

3．5 远端结肠nNOS阳性反应神经元

4．结果分析与讨论

4．1 电针合募穴调节肠功能的效应差异及分析

4．2 肠神经系统中抑制性神经元与便秘的关系

4．3 结肠肌间神经丛n NOS阳性神经元的表达与电针效应的关系

4．4 模型的选择与结果的关系及此模型研究的可能不足

5．结论与展望

参考文献

攻读硕士学位期间取得的学术成果

致谢