BDSF增强RAW264.7巨噬细胞的吞噬作用以及杀伤癌细胞的能力

摘要

本文对BDSF增强RAW264.7巨噬细胞的吞噬作用以及杀伤癌细胞的能力进行了研究。巨噬细胞来源于生物体中的单核细胞，是一种位于组织内的白细胞，具有吞噬病原体等保护机体的作用，十二烷基癸烯酸BDSF是一种来源于细菌的小分子短链脂肪酸，可以抑制白念珠菌的生长。本课题研究BDSF在体外对小鼠RAW264.7巨噬细胞吞噬白念珠菌的作用，及对RAW264.7巨噬细胞的抗癌活性和蛋白组学的影响。通过瑞氏吉姆萨染色法检测BDSF对巨噬细胞吞噬酵母态白念珠菌的吞噬能力的变化，并利用共聚焦显微镜观察巨噬细胞形态变化及吞噬白念珠菌的过程;采用iTRAQ蛋白组学定量检定技术和ELISA试剂盒检测BDSF对巨噬细胞抗癌活性及蛋白组的变化;结果显示，BDSF可显著增强RAW264.7巨噬细胞吞噬白念珠菌的吞噬能力，100μM BDSF提升其吞噬率和吞噬指数近5倍;并且BDSF可以增强巨噬细胞杀伤癌细胞的能力，促进细胞分泌更多的TNF-α，100μM BDSF作用下对癌细胞的杀伤活性和TNF-α表达量可增加4倍。iTRAQ检测结果显示BDSF能够促进RAW264.7巨噬细胞的多种蛋白表达如Siae唾液酸乙酰酯酶和Mgp基质Gla蛋白。本课题中BDSF在细胞免疫学中增强作用显著，对细胞吞噬及癌症治疗等研究具有潜在的意义值得深入研究。

目录

声明

摘要

第一章 绪论

1．1 巨噬细胞免疫功能研究进展

1．1．1 巨噬细胞

1．1．2 巨噬细胞在免疫功能中的作用

1．1．3 巨噬细胞与癌细胞作用相关研究

1．2 白念珠茵及相关疾病研究进展

1．2．1 白念珠菌

1．2．2 BDSF对白念珠菌体外作用的研究

1．3 免疫系统对白念珠菌作用的研究进展

第二章 BDSF对巨噬细胞吞噬酵母态白念珠菌能力的影响

2．1 前言

2．1．1 细胞

2．1．2 菌种

2．1．3 培养基及化学试剂

2．2 实验方法

2．2．1 细胞培养

2．2．2 菌种培养

2．2．3 BDSF对巨噬细胞吞噬酵母态白念珠菌能力的作用

2．2．4 共聚焦显微镜拍摄吞噬过程

2．3 实验结果与分析

2．3．1 BDSF可显著增强巨噬细胞吞噬能力

2．4 本章小结

第三章 BDSF对小鼠RAW264．7巨噬细胞抗癌能力及蛋白组学影响的研究

3．1 前言

3．2 实验材料

3．2．1 细胞

3．2．2 培养基及化学试剂

3．3 实验方法

3．3．1 细胞培养

3．3．2 BDSF对RAW264．7巨噬细胞抑制癌细胞能力的影响

3．3．3 ELISA定量检测肿瘤坏死因子TNF-α

3．3．4 iTRAQ蛋白组学技术检测BDSF对巨噬细胞蛋白组的影响

3．4 实验结果与分析

3．4．1 BDSF增强巨噬细胞杀伤能力

3．4．2 BDSF促进巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子TNF-α

3．4．3 BDSF提高巨噬细胞内多种蛋白质的表达量

3．5 本章小结

第四章 BDSF类似物ATCs对白念珠菌体外作用的研究

4．1 前言

4．2 实验材料

4．2．1 菌种

4．2．2 培养基及化合物

4．3 实验方法

4．3．1 菌株培养

4．3．2 ATCs对酵母相白念珠菌生长的影响

4．3．3 ATCs对白念珠菌两相转化的影响

4．3．4 ATCs白念珠菌菌丝生长长度的影响

4．4 实验结果与分析

4．4．1 ATCs可抑制酵母相白念珠菌出芽生殖与生长

4．4．2 ATCs可抑制白念珠菌由酵母相转化为菌丝相

4．4．1 ATCs可促进菌丝白念珠菌的菌丝缩短

4．5 本章小结

第五章 总结与展望

5．1 总结

5．2 展望

参考文献

附录1 攻读硕士学位期间申请的专利

附录2 攻读硕士学位期间参加的科研项目

致谢