产复合饲用酶的米曲霉突变株固体发酵食用菌菇渣的研究

摘要

本文通过对一株淀粉酶及蛋白酶产生菌进行定向诱变选育，筛选出高产纤维素酶和植酸酶的突变株ZQW48。在菌种进行诱变选育改良过程中，以米曲霉(Aspergillus oryzae)2197-AA为原始菌株，采用紫外线照射处理米曲霉的孢子，得到一株纤维素酶和植酸酶产量较高的诱变株ZQV16，经诱变的菌株纤维素酶酶活为48.23μmol/g.min，植酸酶酶活为1130.53μmol/g.min,较原始菌株分别提高了22.94％和14.19％，同时经过数次传代，其遗传稳定性较好；将经过紫外诱变处理的菌株ZQV16再进行微波诱交处理，又一次获得诱变株ZQW48，其诱变菌株的纤维素酶酶活为72.15μmol/g.min，植酸酶酶活为1207.42μmol/g.min，较出发菌株分别提高85％和21.96％。同时再进行数次传代，其遗传性较稳定。 用突变株ZQW48对金针菇菇渣进行固体发酵，并进行发酵条件优化，通过对碳源、氮源、无机盐、温度、固水比、磷源等影响因素的研究，较理想的固体发酵条件为：菇渣：麸皮=1:1，氯化铵；蛋白胨=6:1，硫酸镁0.07％，氯化纳0.5％，磷酸二氢钾0.02％，固水比为1:1，最佳培养温度35℃，优化后产纤维素酶活可达161.55μmol/g.min，较出发菌株提高314.23％，产植酸酶活力达1541.13μmol/g.min，较出发菌株提高55.67％。通过对处理组和对照组固体发酵转化盼金针菇菇渣培养物中植酸含量的测定，处理组的植酸含量比对照组植酸含量较下降，说明诱变株ZQW48中含有植酸酶；对处理组和对照组菇渣培养物的氨基酸等营养成分的检测，处理组菇渣培养物的氨基酸成分明显高于对照组，所含16种氨基酸中有7种是人和动物必需氨基酸，营养成分与小鼠基础饲料的十分接近。 将经过固体发酵转化的金针菇菇渣培养物进行小鼠急性毒性试验，灌胃20d未发现死亡，表明固体发酵培养物无毒，并用其作饲料的部分代料饲喂D-半乳糖衰老模型小鼠，饲喂50天，检测添加不同比例的菇渣培养物对小鼠生长性能、养分消化率、总P和总N消化率、衰老模型小鼠脏器指数、血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响。结果表明，金针菇菇渣发酵转化物营养成分较全面，可替代部分饲料，不影响小鼠的采食量。饲料中添加10％金针菇菇渣发酵转化物为最佳添加量，此添加剂量和对照组比较，小鼠的平均日增重量提高12.5％、料重比减少了9.13％，而小鼠对营养成分的消化率也得到了提高，消化了69.3％的粗脂肪和57.25％的粗纤维，并可提高小鼠对饲料总P、总N的消化吸收利用率，分别为38.91％和31.58％，且与对照组有极其显著的差异。

目录

文摘

英文文摘

声明

前言

1.植酸酶概述

1.1植酸酶的作用

1.2植酸酶的来源及酶学特性

1.3植酸酶在家禽饲料中的应用前景

2.纤维素酶概述

2.1纤维素酶的作用

2.2纤维素酶来源

2.3纤维素酶的应用

3.米曲霉的概述

3.1米曲霉的应用

4.秸杆资源

5.立题依据

参考文献

第一章产酶米曲霉的诱变筛选和纯化

1.材料与方法

1.1菌种来源

1.2试剂和培养基

1.3实验方法

2.结果与分析

2.1紫外诱变致死率及诱变效果

2.2微波诱变致死率及诱变效果

3.讨论

参考文献：

第二章米曲霉突变株固体发酵培养条件优化

1.材料与方法

1.1实验材料

1.2实验方法

2.结果与分析

2.1不同种类氮源对米曲霉突变株产酶的影响

2.2不同无机盐对米曲霉突变株产酶的影响

2.3正交实验的结果

2.4氮源不同配比对米曲霉突变株产酶的影响

2.5不同固水比对产酶的影响

2.6不同温度对产酶的影响

2.7磷源浓度对产酶的影响

2.8优化后对植酸含量的影响

3.讨论

参考文献

第三章通过降解的菇渣作为饲料添加剂在小鼠试验中的应用

1.材料与方法

1.1材料

1.2方法

1.3指标测定

1.4数据处理与分析

2.结果与分析

2.1米曲霉转化菇渣前后和基础饲料氨基酸构成与含量和营养学评价

2.2小鼠基础试验

2.3小鼠基础消化试验

2.4小鼠功能性试验

3.讨论

参考文献：

结论

研究的主要结论：

有待于进一步探讨的问题：

附录：硕士期间发表论文概况

致谢