L-肉碱对奥硝唑所致雄性大鼠繁殖能力低下保护作用的研究

摘要

不育症是严重影响人类生殖健康与社会和谐的一种全球性疾病，其发病率占已婚夫妇的10％～15％，其中，男方因素约占50％。目前，临床上所采用的男性不育治疗药物绝大多数为经验性治疗药物，其疗效与作用机制尚存在争议。
　　 肉碱（carnitine）是一种广泛存在于机体组织中的小分子、水溶性必需营养素,为氨基酸衍生物，有左旋（L-）、右旋(D-)两种异构体，L-肉碱（L-carnitine）在体内具有生物活性。L-肉碱是线粒体脂肪酸β-氧化过程中的一个重要成分，在心血管、神经及生殖等系统均具有重要的生理作用。在男性生殖中，具有提高附睾功能、参与精子能量代谢、降低精浆中活性氧物质、抗精子凋亡等作用。男性附睾组织、精浆和精子中含有体内最高浓度的游离肉碱，附睾是精浆中游离肉碱的主要来源。
　　 男性生殖系统中的L-肉碱主要是通过肉碱转运蛋白，即OCTN1、OCTN2和OCTN3，以主动转运方式从血液中摄取。这些肉碱转运蛋白都属于有机阳离子转运蛋白家族（OCT），在这些OCT 转运蛋白中，OCTN2 是一种高亲和力的肉碱转运蛋白，人的OCTN2的突变会引起全身肉碱缺乏症。
　　 奥硝唑(ornidazole,ORN),是继甲硝唑、替硝唑之后的第三代硝基咪唑类衍生物，具有良好的抗厌氧菌和抗原生质(如滴虫等)感染作用。国内外文献报道，其对雄性大鼠的生殖功能具有可逆性抑制作用。
　　 本研究使用奥硝唑降低大鼠繁殖能力，以L-肉碱为实验治疗药物，以SD 大鼠为研究对象。以奥硝唑灌胃性成熟大鼠，建立繁殖能力低下的动物模型，并给予L-肉碱进行治疗，探讨L-肉碱对奥硝唑所致雄性SD 大鼠繁殖能力低下的保护作用,为L-肉碱的临床治疗提供依据。
　　 研究结果显示：
　　 1. L-肉碱能够保护大鼠生殖系统对抗一定浓度奥硝唑引起的氧化损伤，对大鼠生殖指标起恢复作用。
　　 奥硝唑使雄性SD 大鼠生殖系统中的丙二醛（MDA）升高，超氧化物歧化酶（SOD）和总抗氧化能力（TAC）降低，用L-肉碱治疗后，中剂量奥硝唑组中，上述各项指标均恢复到正常水平，与对照组比较无差别（P>0.05）。
　　 2. L-肉碱能增加精子数目，提高精子活力。
　　 奥硝唑能降低大鼠精子活力，并使雄性大鼠睾丸生精功能减弱，导致精子数目减少，用L-肉碱治疗后，中剂量奥硝唑组引起的精子活力降低和精子数目减少均得到恢复，与对照组无差别（P>0.05）。
　　 3. L-肉碱能恢复中剂量奥硝唑所致的大鼠繁殖功能低下。
　　 表现为以奥硝唑连续灌胃20 d 后，大鼠睾丸系数、附睾系数降低，与雌鼠交配发现，雌鼠体内的胚胎数明显减少，用L-肉碱治疗后，中剂量奥硝唑组的大鼠上述各项指标均得到恢复，繁殖能力明显提高。
　　 4. 荧光定量PCR 检测动物模型中肉碱转运蛋白OCTN2 mRNA的表达情况。
　　 奥硝唑抑制肉碱转运蛋白OCTN2的表达，使附睾中的肉碱减少，用L-肉碱治疗后，肉碱转运蛋白OCTN2的表达恢复到正常水平。
　　 据此得出以下结论：
　　 1. 染毒中剂量和高剂量奥硝唑组雄性大鼠繁殖能力降低，用L-肉碱治疗后，中剂量奥硝唑组大鼠繁殖能力得到恢复，并与对照组无差异（P>0.05）。
　　 2. 长时间灌胃奥硝唑对OCTN2的表达有一定抑制作用，用L-肉碱治疗后，OCTN2的表达恢复到正常水平。

目录

文摘

英文文摘

声明

前 言

参考文献

第一章 肉碱及肉碱转运蛋白与男性生殖的关系

第二章 L-肉碱在奥硝唑所致雄性大鼠生殖系统氧化损伤中的保护作用

第三章 L-肉碱对奥硝唑所致弱精子症大鼠的治疗作用

第四章 L-肉碱对奥硝唑所致雄性大鼠繁殖能力低下的保护作用

第五章 L-肉碱及奥硝唑所建动物模型中OCTN2 的表达情况

全文总结

附录：硕士研究生期间论文发表情况

致 谢