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半胱胺和海南霉素对山羊肌内共轭亚油酸含量与脂肪酸组成的影响及其机理研究

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引言

第一篇 文献综述

第一章 肉羊生产和羊肉品质

第二章 羊肉中脂肪酸组成以及影响因素

第三章 反刍动物体内共轭亚油酸的生成与硬脂酰辅酶A脱氢酶(SCD)的关系

第四章 半胱胺和离子载体对反刍动物作用的研究进展

第二篇 试验研究

第一部分毛细管气相色谱法测定肌内脂肪酸甲酯方法的建立

1.肌内脂肪的抽提

2.脂质甲酸化反应

3.毛细管气相色谱(GC)分析

4.讨论

第二部分半胱胺和海南霉素对山羊肌内共轭亚油酸(CLA)含量及脂肪酸组成的影响及其分子机理研究

试验一 半胱胺和海南霉素对山羊肌内共轭亚油酸含量及脂肪酸组成的影响

试验二 半胱胺和海南霉素对山羊半腱肌肉和肝脏中硬脂酰辅A脱氢酶(SCD)表达的影响

参考文献

全文结论

致谢

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摘要

针对人们日益增长的肉品品质需求,本实验选择波杂一代山羊为研究对象,研究日粮添加半胱胺(CS)和海南霉素(HM)对山羊骨骼肌肌内脂肪、共轭亚油酸(CLA)含量以及脂肪酸组成的影响,并对其可能的作用机制进行初步探讨。 1.确定并优化肌肉样品中脂肪酸甲酯的气相色谱测定条件选取2克山羊肌肉样品,匀浆后,用Folch法抽提肌肉样品中的脂质(氯仿/甲醇V/V 2:1溶液)。取其中40mg脂质用2ml正己烷溶解,采用0.5M甲醇钠进行甲酯化反应,生成脂肪酸甲酯。脂肪酸甲酯在Agilent6890N气相色谱仪上使用强极性的SP-2560脂肪酸甲酯测定专用毛细管柱(100m ×0.25 m m×0.20μm,Supelco Inc,BelIefonte,PA)进行分离,通过氢火焰离子化检测器(FID)进行测定。为了提高毛细管柱的分离效果,采用程序升温条件,初始温度为150℃,保持5分钟以后以2℃/分钟的速率升至175℃,保持15分钟后以7℃/分钟的速率升至200℃,保持20分钟以5℃/的分钟速率升至220℃,保持25分钟。最后,通过与标准品比较,对山羊肌肉样品中各种脂肪酸成份进行定性与定量分析。 2.半胱胺(CS)和海南霉素(HM)对山羊骨骼肌肌内脂肪与CLA含量的影响选取健康、体重一致(15±1kg)的3月龄育肥山羊90头,随机分成三组:组Ⅰ饲喂基础日粮,组Ⅱ基础日粮中添加900 mg·kg-1 CS,组Ⅲ添加5mg·kg-1 HM。60天后每组随机选10头宰杀,取背最长肌和半腱肌,采用索氏抽提法测定肌内脂肪含量,采用气相色谱分析法测定肌肉中CLA以及其它具有重要生理功能的脂肪酸的含量。结果显示:对照组背最长肌肌内脂肪含量比半腱肌高62.3%(P<0.05),每克肌肉中CLA含量比半腱肌高41.9%(P<0.05);半胱胺和海南霉素对山羊肌内脂肪含量无显著影响,但半胱胺能够有效提高羊肉中CLA含量,半胱胺处理组半腱肌肌内脂肪中CLA含量与对照组相比增加26.5%(P<0.05);日粮添加海南霉素使背最长肌肌内脂肪中CLA含量提高10.1%,但作用不显著。 3.半胱胺(cS)和海南霉素(HM)对山羊骨骼肌肌内脂肪酸影响的机制反刍动物体内富含具有特殊生理功能的共轭亚油酸(CLA),其主要通过组织中的硬脂酰辅酶A脱氢酶(SCD)对瘤胃生成的反式油酸(TVA)作用生成。半胱胺(CS)能耗竭机体内的生长抑素(ss),促进生长激素、IGF-1、胰岛素、甲状腺素、β-内啡肽之类与生长相关的激素分泌;生长激素又能够影响动物体内SCD的表达。因而CS可能通过作用SCD影响反刍动物体内CLA含量。本试验以上述动物的半腱肌和肝脏为样品,对其中SCDmRNA的表达进行了测定。结果显示,日粮中添加CS对山羊半腱肌和肝脏中SCDmRNA的表达有提高趋势。结果提示,CS提高山羊半腱肌中CLA以及脂肪含量可能部分是通过CS促进SCDmRNA的表达实现的。海南霉素(HM)与CS比较,对山羊半腱肌和肝脏中SCDmRNA的表达作用都不明显。

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