PRRSV不同毒株对仔猪致病性比较及其灭活疫苗免疫效果观察

摘要

猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproduction and respiratory syndrome，PRRS)是以母猪繁殖障碍、仔猪呼吸道症状为主要特征的具有高度传染性的病毒病，该病1987年最早发现于美国，目前该病在我国大部分地区已经广泛流行，不同时间不同地区分离的毒株其致病性有所不同。目前该病给我国当前的养猪业带来了非常严重的危害，但尚无有效的防制方法。2006年，在我国南方地区暴发了以高致病性PRRSV为主要病原的以高热、高发病率为特征的传染病，本实验室在流行病原调查的基础上分离获得一株PRRSV SY0608高变异株。本文进一步评价了该变异毒株的致病特性并研制出了针对高致病性PRRSV的灭活疫苗，以期获得比较理想的免疫效果。 PRRSV不同分离株对仔猪致病性的比较研究：本研究采用11头30日龄PRRSV阴性仔猪，随机分为3组。第一组5头接种S1毒株，第二组4头接种SY0608毒株，第三组2头作为空白对照。攻毒后通过观察临床症状、病理学变化和病毒在组织中的分布，进一步研究该高变异病毒株对仔猪的致病特性。结果为：(1) SY0608毒株感染组仔猪表现明显临床症状，接种3天后体温急剧升高至41.8℃；白细胞数急剧减少(降低了45％)；病理学变化严重，肺泡膈增宽，大部分肺组织肺泡不张；而S1株感染组仔猪仅出现轻微临床症状和病理变化。(2) SY0608毒株感染组仔猪病毒血症持续时间较S1毒株感染组长，病毒在脏器中的分布更为广泛。(3) SY0608株感染组血清ELISA抗体水平明显高于S1株感染组。结果表明SY0608毒株对仔猪致病作用要明显强于S1毒株 猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗制备与免疫效果观察：本研究选用本实验室分离鉴定的PRRSV-SY0608强毒株病毒液，分别采用细菌多糖和白油为佐剂制成油乳剂PRRS灭活疫苗。采用商品化仔猪进行免疫保护试验，二免后3周用SY0608强毒株攻毒。结果为：(1) PRRSV白油佐剂灭活疫苗免疫后35天，用同源PRRSV强毒攻击，其临床症状病理变化与非免疫攻毒对照组无明显差异。(2) PRRSV-多糖白油佐剂灭活苗免疫组间隔3周，加强免疫，结果ELISA抗体则有明显升高。非免疫对照组仔猪出现明显临床症状病理变化，免疫组仔猪也出现临床症状，但症状轻微，病程缩短，病理学变化也明显轻微，病毒血症，鼻、肛排毒及不同组织中PRRSV阳性率则无显著差别。 本研究结果表明SY0608毒株致病性明显强于十年前我国分离的传统毒株S1，其组织嗜性明显广泛；通过免疫保护试验证实，该研究制备的PRRSV-多糖白油佐剂灭活疫苗具有一定保护作用，其免疫保护效果优于PRRSV白油佐剂灭活疫苗仍不是很理想，需进一步改进。

目录

文摘

英文文摘

声明

第一章 猪繁殖与呼吸综合征研究进展

1病原学

1.1形态特征

1.2理化特征

1.3生物学特征

1.4基因组成及其功能

1.5基因型与基因变异

2流行病学

3发病机制

4临床症状

4.1急性感染型

4.2慢性型

4.3亚临床型

5病理变化

6诊断方法

6.1临床诊断

6.2组织病理学诊断

6.3血清学诊断

6.4病毒的分离

6.5分子生物学诊断

6.6免疫组化法

7疫苗研究进展

7.1弱毒疫苗

7.2灭活苗

7.3亚单位疫苗

7.4基因工程重组疫苗

7.5 DNA疫苗

8结语

参考文献

第二章 猪繁殖与呼吸综合征病毒不同分离株对仔猪致病性的比较

摘要

引言

1材料和方法

1.1病毒

1.2细胞及细胞培养液

1.3主要试剂和仪器

1.4病毒TCID50的测定

1.5仔猪人工感染试验

1.6血相检测

1.7病理学检查

1.8 RT-PCR检测PRRSV

1.9 PRRSV特异性ELISA抗体检测

2结果

2.1 ELISA抗体

2.2临床症状比较

2.3血相检测比较

2.4病理变化

2.5病毒血症

2.6不同组织中PRRSV检测

3讨论

4小结

参考文献

第三章 猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗制备与免疫效果观察

摘要

引言

1材料和方法

1.1材料

1.2 PRRSV的增殖及其滴度测定

1.3 PRRSV的灭活及检验

1.4油乳剂灭活苗的制备

1.5油佐剂灭活疫苗的质量检验

1.6免疫保护试验设计

1.7组织病理学检查

1.8 PRRSV RT-PCR检测

1.9 ELISA试验

2结果

2.1 PRRSV增殖及其滴度测定

2.2灭活病毒的检验

2.3灭活疫苗物理性状测定

2.4疫苗安全性

2.5仔猪免疫保护试验

3讨论

4小结

参考文献

全文总结

致谢