纳豆芽孢杆菌的沸石吸附条件筛选及其缓解产气荚膜梭菌对肉鸡负面影响的研究

摘要

本试验主要研究沸石对纳豆芽孢杆菌的吸附作用和吸附后的纳豆芽孢杆菌对感染产气荚膜梭菌肉鸡的影响。试验共分三部分：
　　 试验一测定了纳豆芽孢杆菌的生长曲线及不同粒度沸石改性前后吸铵值的大小；利用JMP软件的Plackett-Burman设计法和完全析因设计法，对沸石吸附纳豆芽孢杆菌的条件进行筛选。试验结果表明：本试验所用纳豆芽孢杆菌的最佳培养时间是8h；沸石的吸铵值随着粒度的降低而升高，高温改性可以提高沸石的吸铵值。沸石吸附纳豆芽孢杆菌的最佳条件是：粒度400目，添加量0.7g/mL，时间10min，温度35℃，转速150rpm。
　　 试验二研究纳豆芽孢杆菌对感染产气荚膜梭菌肉鸡生产性能及血清相关指标的影响。将480只1d AA肉鸡随机分为5个处理，每个处理6个重复，每个重复16只，各组饲喂如下日粮：对照组（非感染攻毒），对照日粮；感染组（感染攻毒），对照日粮；抗生素感染组（感染攻毒），对照日粮+杆菌肽锌（400mg/kg）；100mg/kg纳豆菌感染组（感染攻毒），对照日粮+100mg/kg纳豆菌；200mg/kg纳豆菌感染组（感染攻毒），对照日粮+200mg/kg纳豆菌。分别在肉鸡第14-16d（前期）和34-36d（后期）用低剂量的产气荚膜梭菌（自行活化和培养，其新鲜肉汤培养物中菌数约为108/mL）对感染组、抗生素感染组、100mg/kg纳豆菌感染组和200mg/kg纳豆菌感染组肉鸡进行饮水攻毒。测定肉鸡生产性能及血清相关指标。结果表明：1.感染产气荚膜梭菌可导致肉鸡生产性能下降；前、后期血清中MDA含量分别升高30.56％（P>0.05）、95.60％（P<0.01），SOD活性分别降低29.74（P<0.01）、5.90％（P>0.05），GSH-Px活性分别降低20.38％（P<0.05）、16.82％（P>0.05）；后期血清中碱性磷酸酶（AKP）活性提高61.07％（P<0.05）；前、后期血清T3和T4的含量均无显著影响（P>0.05），但在一定程度上提高了T3的含量；前期血清免疫球蛋白IgA、IgG的含量有所提高（P>0.05），后期IgA、IgG含量有所降低（P>0.05）。2.与感染组相比，添加200mg/kg载菌沸石可在一定程度上改善肉鸡后期及全期的生产性能。3.添加100mg/kg纳豆芽孢杆菌使感染肉鸡前、后期血清中MDA的含量分别降低了18.18％（P>0.05）和28.61％（P<0.01），200mg/kg纳豆芽孢杆菌使感染肉鸡前、后期血清中MDA的含量降低19.01％（P>0.05）和29.40％（P<0.01）；100mg/kg和200mg/kg纳豆芽孢杆菌分别提高了感染肉鸡前期血清中SOD的活性20.05％（P>0.05）和20.11％（P>0.05）；纳豆芽孢杆菌使肉鸡血清中GSH-Px活性也有一定的提高，但无显著性差异（P>0.05）。4.100mg/kg和200mg/kg纳豆芽孢杆菌处理对肉鸡血清各生化指标均无显著差异（P>0.05），但AKP相对于感染组分别降低了14.38％和17.70％（P>0.05）。5.相对于感染组，纳豆芽孢杆菌则明显提高了肉鸡后期血清中T4的含量（P<0.05），但对前期血清T4及前、后期T3影响不大（P>0.05）。
　　 试验三研究纳豆芽孢杆菌对感染产气荚膜梭菌肉鸡器官指数、血清DAO、NO及细胞凋亡的影响。材料和方法同试验二。结果表明：1.与对照组相比，感染产气荚膜梭菌使肉鸡前后期各器官影响均有不同程度提高，但影响不大（P>0.05）；可导致肉鸡后期血清中二胺氧化酶（DAO）活性提高37.68％（P<0.05），前、后期血清一氧化氮（NO）含量分别提高138.61％（P<0.01）和14.37％（P>0.05）；使肉鸡胸腺死亡细胞升高（P>0.05），活细胞数量下降（P>0.05）。2.与感染组相比，添加100mg/kg和200mg/kg纳豆芽孢杆菌后，血清中DAO活性分别降低了17.73％（P>0.05）和19.61％（P>0.05）。3.添加100mg/kg和200mg/kg的纳豆芽孢杆菌，相比于感染组血清中NO含量，前期分别降低了29.93％（P<0.01）和48.51％（P<0.01），后期分别降低了7.27％（P>0.05）和10.99％（P>0.05）。4.相对于感染组，添加纳豆芽孢杆菌降低了后期胸腺死亡细胞数量（P>0.05），提高了后期胸腺活细胞数量（P>0.05），降低了前期胸腺凋亡细胞的数量（P>0.05）；对肉鸡脾脏细胞无影响（P>0.05）；降低了肠黏膜前期凋亡细胞数量（P>0.05）和后期死亡细胞数量（P>0.05），提高了后期活细胞数量（P>0.05）。

目录

文摘

英文文摘

本文缩略词中英文对照表

前言

文献综述

1 产气荚膜梭菌及坏死性肠炎

1.1 产气荚膜梭菌

1.2 坏死性肠炎

2 芽孢杆菌

2.1 芽孢杆菌的生物学特性

2.2 芽孢杆菌的作用

2.3 芽孢杆菌的作用机理

2.4 纳豆芽孢杆菌

3 益生菌生产工艺

3.1 发酵工艺

3.2 吸附工艺

3.3 沸石

4 沸石吸附细菌理论

4.1 DLVO理论

4.2 表面络合理论

5 本研究的目的、内容和意义

参考文献

试验研究

试验一 纳豆芽孢杆菌的沸石吸附条件筛选

1 材料与方法

2 结果与分析

3 讨论

4 小结

参考文献

试验二 纳豆芽孢杆菌对感染产气荚膜梭菌肉鸡生产性能及血清相关指标的影响

1 材料与方法

2 结果与分析

3 讨论

4 小结

参考文献

试验三 纳豆芽孢杆菌对产气荚膜梭菌感染肉鸡器官指数、血清DAO、NO及细胞凋亡的影响

1 材料与方法

2 结果与分析

3 讨论

4 小结

参考文献

全文结论

致谢

攻读硕士学位期间发表论文