氟乐灵与秋水仙素诱导萝卜同源四倍体及小孢子培养初步研究

摘要

萝卜（Raphanus sativus L.）是中国一种重要蔬菜作物，种质资源丰富。多倍体育种能够提高作物产量与品质;游离小孢子培养能够在短时间内获得纯合植株，缩短育种时间。但是目前萝卜多倍体种质高效的诱导体系尚未建立，特别是采用氟乐灵诱导萝卜多倍体研究还未见报道;萝卜游离小孢子培养胚状体与再生植株频率比较低。
　　 本研究采用秋水仙素和氟乐灵两种试剂诱导同源四倍体植株，并比较不同的倍性鉴定方法;通过小孢子培养筛选出具有成胚能力的基因型，探讨影响萝卜小孢子培养中胚状体产生的因素，以期为萝卜四倍体与单倍体植株高效诱导和种质创新提供技术支撑。萝卜四倍体诱导技术体系研究中，以本实验室保存的6个萝卜基因型为材料，用秋水仙素和氟乐灵两种药剂诱导同源四倍体植株。研究结果表明，采用生长点滴定法，以0.1％的秋水仙素处理，在6个基因型中都获得了四倍体植株，Nau-xht与Nau-zhqh诱导率最高(16.67％)。采用0.2 mmol/L和1 mmol/L氟乐灵除草剂处理，Nau-dy(1)3与Nau-xbch都获得四倍体，诱变率为40％，诱导效果比秋水仙素诱导的效果明显增加。四倍体植株气孔大小、保卫细胞内叶绿体数目、花器官大小、花粉粒纵横径都与二倍体植株存在显著差异，表现出“巨大性”。研究表明将形态学鉴定、气孔鉴定和染色体计数鉴定结合起来可以准确确定变异株的倍性。
　　 本研究在萝卜同源四倍体种质创新与鉴定方面，采用0.1％秋水仙素滴定11个萝卜基因型幼苗生长点，均得到四倍体植株，诱导率最高为33.33％，最低为16.67％，并通过植株形态鉴定、气孔特征鉴定、花粉粒鉴定和染色体计数法鉴定出了萝卜四倍体植株。在萝卜小孢子培养研究中，以本实验室96个萝卜基因型为材料，筛选具有成胚能力的基因型，并对花蕾长度与小孢子发育时期的关系、及培养基中添加不同浓度的2，4-D，6-BA等影响游离小孢子培养的因素进行研究。研究结果表明:有7个基因型形成了胚状体，基因型是决定胚状体发生的决定因素;其中材料“09-4265”形成了再生植株;花蕾长度为3-4.5 mm时小孢子发育阶段处于单核靠边期;NLN-13培养基中添加0.2 mg/L2，4-D和0.1 mg/L的6-BA能够有效促进胚状体的形成。

目录

声明

摘要

缩略词表

引言

第一章 文献综述 萝卜多倍体种质创制与游离小孢子培养研究进展

1 萝卜多倍体研究进展

1．1 创造萝卜多倍体的方法

1．2 萝卜多倍体鉴定方法

1．3 萝卜多倍体育种中的困难

2 萝卜游离小孢子培养

2．1 小孢子培养的机理

2．2 影响游离小孢子培养成功的因素

2．3 本研究目的与意义

第二章 氟乐灵诱导萝卜同源四倍体研究

1 材料与方法

1．1 试验材料

1．2 试验方法

1．3 鉴定方法

1．4 数据分析

2 结果与分析

2．1 不同药剂诱导同源四倍体效果比较

2．2 植株倍性的鉴定

3 讨论

3．1 不同药剂诱导萝卜四倍体效果

3．2 四倍体萝卜不同鉴定方法

第三章 萝卜同源四倍体种质创新与鉴定研究

1 材料与方法

1．1 试验材料

1．2 试验方法

1．3 鉴定方法

2 结果与分析

2．1 秋水仙素处理后的植株形态观察

2．2 秋水仙素处理后变异株的气孔变化

2．3 秋水仙素处理后变异植株的花粉大小形状

2．4 秋水仙素处理诱导四倍体植株及花粉母细胞特征

3 讨论

第四章 萝卜小孢子培养初步研究

1 材料与方法

1．1 试验材料

1．2 试验方法

2 结果与分析

2．1 小孢子发育时期的观察

2．2 不同基因型间胚状体诱导效果比较

2．3 不同培养基对胚状体诱导的影响

3 讨论

3．1 小孢子发育时期对游离小孢子培养的影响

3．2 不同的基因型对游离小孢子影响

3．3 不同培养基成分对游离小孢子培养的影响

全文结论

参考文献

发表论文情况

致谢