五谷虫粗提物抗菌消炎和调节动物免疫作用的初步研究

摘要

近年来，随着抗生素的滥用以及细菌耐药情况的日渐严重，中草药开始逐渐成为了替代抗生素等药物的研究热点之一。五谷虫作为传统中药材外敷有治疗臁疮的作用，国内外已有很多外科医生将五谷虫应用到感染创口的清创中，此外，对五谷虫的抗菌特性也多有报道。本试验以五谷虫粗提物为研究对象，研究了经过超声波诱导处理之后的五谷虫粗提物体内、体外对致病性大肠杆菌的抑制效果，探讨了五谷虫粗提物对二甲苯引起的小鼠急性耳肿胀炎症模型的作用效果，研究了五谷虫粗提物对小鼠免疫机能的调节作用以及对新城疫灭活疫苗免疫的鸽血清抗体水平消长的影响。通过对五谷虫粗提物抗菌消炎作用及其对机体免疫机能影响的研究，为临床上寻找替代抗生素的药物提供了很好的理论依据，也为进一步研究和探讨五谷虫抗菌消炎的作用机理做了铺垫。
　　 试验Ⅰ五谷虫粗提物对大肠杆菌的抑制作用i五谷虫粗提物体外抗菌试验目的研究五谷虫粗提物体外对致病性大肠杆菌的抑制效果。方法本试验采用了针刺诱导、超声诱导两种诱导方式在0h、24h、48h、72h后制备的五谷虫粗提物，以平板法研究两种诱导方式对大肠杆菌的抑制效果。结果超声诱导后制备的五谷虫粗提物的抑菌效果要优于针刺诱导后提取的五谷虫粗提物的抑菌效果，针刺诱导后24h的五谷虫粗提物对大肠杆菌的抑制效果最好，而超声波诱导后48h的五谷虫粗提物对大肠杆菌的抑制效果最好。
　　 ii五谷虫粗提物体内抑菌试验目的为进一步研究五谷虫粗提物在体内对大肠杆菌的抑制效果，进行了五谷虫粗提物治疗小鼠感染创的效果观察。方法采用大肠杆菌感染小鼠创面作为体内抑菌试验的模型，取健康雄性ICR小鼠50只，其中10只作为正常对照组，其余40只随机分为4组，每组10只，分别为抗生素治疗组、五谷虫粗提物治疗组A、五谷虫粗提物治疗组B以及生理盐水对照组，切除小鼠背部全层皮肤，用大肠杆菌菌悬液涂抹小鼠创面使其感染，每日各组采用对应药物进行治疗，伤后3天尾静脉采血检查白细胞及外周血液多项指标的变化，并于试验期结束时检查小鼠的体重变化及存活率。结果五谷虫治疗组小鼠的健康状况、死亡情况、创口愈合情况明显优于生理盐水对照组，但与抗生素治疗组相比，并无显著差异。
　　 试验Ⅱ五谷虫粗提物的抗炎效果及对小鼠机体免疫调节的影响目的探讨五谷虫粗提物对急性炎症的抑制效果以及对机体免疫机能的影响。方法利用耳肿胀法判断五谷虫粗提物对小鼠的抗炎效果，通过免疫器官指数、血清部分生化指标、血清溶血素含量检测及碳廓清指数的测定来考察五谷虫粗提物对小鼠免疫功能的影响。结果五谷虫粗提物能够明显降低小鼠的耳肿胀程度，显著提高小鼠脾和胸腺指数，能够提高血清中球蛋白的含量，同样能够显著提高小鼠半数溶血值(HC50)及吞噬指数(a)(P＜0.05)。由此可以推断，五谷虫粗提物有抗炎作用，且能够提高小鼠的免疫功能。
　　 试验Ⅲ五谷虫粗提物对新城疫灭活疫苗免疫的鸽血清抗体水平消长的影响目的研究探讨五谷虫粗提物对新城疫灭活疫苗免疫鸽血清抗体水平消长的影响以及对鸽机体免疫机能的影响。方法将试验鸽分为4组，分别为五谷虫低剂量组、五谷虫中剂量组、五谷虫高剂量组及对照组，于试验期接种新城疫灭活疫苗后，观察各组鸽子精神状态、采食、饮水情况，于免疫后1-7周采血，分离血清，进行血清抗体水平检测。结果在免疫后1周，血清中抗体开始升高，2-3周达到高峰，于第6周开始有下降的趋势，五谷虫灌胃组的抗体水平均高于对照组，且差异显著(P＜0.05)，但五谷虫灌胃组各组间无明显差异(P＞0.05)。由此可以推断，五谷虫粗提物能够提高新城疫灭活疫苗免疫的鸽血清抗体水平，对鸽子的体液免疫有一定的增强作用。

目录

声明

摘要

中英文缩略词

第一章 文献综述

1 抗菌消炎中药的研究概述

1．1 抗菌消炎中药简介

1．2 中药的有效成分

1．3 抗菌消炎中药的作用机理研究

1．4 中药体外抑菌的试验研究方法

1．5 影响中药药理作用的因素

2 中药五谷虫的研究概述

2．1 国内外对五谷虫的应用进展

2．2 蝇类昆虫的免疫防御体系

2．3 抗菌肽的分类

2．4 抗菌肽可能存在的作用机理

3 本试验的目的、意义及内容

3．1 本试验的目的和意义

3．2 本试验的实验内容及实验设计

参考文献

第二章 五谷虫的实验室养殖

1 材料和方法

1．1 实验材料

1．2 实验方法

2 结果分析

2．1 EM液制备是否成功的判断

2．2 不同饲养基料对五谷虫生长发育的影响

2．3 不同环境条件五谷虫幼虫生长发育的影响

3 讨论

参考文献

第三章 五谷虫粗提物体外抑菌作用的测定

1 材料与方法

1．1 实验材料

1．2 实验方法

2 实验结果

2．1 超声处理后不同时间段五谷虫粗提物的抑菌活力

2．2 针刺处理后不同时间段五谷虫粗提物的抑菌活力

2．3 针刺、超声两种不同方式处理后五谷虫粗提物的抑菌活力比较

3 讨论

3．1 五谷虫的消毒方法

3．2 抑菌实验指示菌种的选择

3．3 不同诱导方式以及同一诱导方式在不同时间段五谷虫粗提物的抑菌效果

参考文献

第四章 五谷虫粗提物治疗小鼠感染创的效果观察

1 材料与方法

1．1 实验材料

1．2 实验方法

2 结果

2．1 创面感染情况

2．2 白细胞计数及外周血象的变化情况

2．3 小鼠的体重及存活情况

3 讨论

参考文献

第五章 五谷虫粗提物的抗炎效果及对小鼠免疫调节的影响

1 材料与方法

1．1 实验材料

1．2 实验方法

2 实验过程

2．1 试验动物分组及处理

2．2 对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响(抗炎实验)

2．3 免疫器官指数测定

2．4 血清生化指标测定

2．5 对小鼠血清溶血素抗体生成的影响(半数溶血值HC50的测定)

2．6 对正常小鼠单核一巨噬细胞吞噬功能的影响(碳廓清实验)

3 结果

3．1 对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响(抗炎实验)

3．2 小鼠免疫器官指数的测定

3．3 血清生化指标测定

3．4 对小鼠血清溶血素抗体生成及对正常小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能的影响

4 讨论

4．1 五谷虫粗提物对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响(抗炎实验)

4．2 五谷虫粗提物对小鼠免疫器官指数的影响

4．3 五谷虫粗提物对小鼠血清生化指标的影响

4．4 五谷虫粗提物对血清溶血素抗体生成的影响

4．5 五谷虫粗提物对碳廓清指数的影响

参考文献

第六章 五谷虫粗提物对新城疫灭活疫苗免疫鸽血清抗体水平消长的影响

1 材料与方法

1．1 实验材料

1．2 实验方法

2 结果

3 讨论

参考文献

全文总结

论文创新点与不足之处

致谢