兽疫链球菌(Streptococcus zooepidemicus)发酵生产透明质酸工艺条件研究

摘要

本文以兽疫链球菌（Streptococcuszooepidemicus）为菌种，进行透明质酸发酵条件研究。首先进行摇瓶发酵条件的优化，包括摇瓶培养温度、pH、装液量、发酵时间的优化;其次进行摇瓶发酵培养基的优化实验，通过响应面法分析得到主效成分葡萄糖和酵母膏的最佳浓度;最后对透明质酸小型发酵罐的发酵条件进行研究，通过上述实验旨在为透明质酸进一步的大规模生产提供参考，具体结果如下:
　　1、为了进一步提高兽疫链球菌发酵生产透明质酸产量，通过控制温度、pH、发酵时间、装液量来优化摇瓶发酵条件。通过单因素试验得出最适pH，最适温度，最适发酵时间，最适装液量。摇瓶培养在36℃下菌体量最多，在37℃下透明质酸产量最高;在pH7.0时菌体量及透明质酸产量都达到最高;发酵时间在24h是透明质酸产量最高，菌体量最多;装液量在40％时，透明质酸产量最高，菌体量最多。
　　2、利用Plaekett-Burman设计及响应面分析法(RSM)对透明质酸产生菌摇瓶发酵培养基进行优化，确定了影响透明质酸产量的关键因子为葡萄糖和酵母膏，经过分析得到葡萄糖最佳浓度为55.78g/L，酵母膏最佳浓度为23.43g/L。通过对培养基的优化，透明质酸产量得到提高，实验值与预测值基本一致。
　　3、试验在5L发酵罐中，通过不同通气量、不同搅拌转速以及不同发酵温度进行透明质酸发酵单因素试验，结果表明:小型发酵罐透明质酸发酵最佳通气量为3L/min，搅拌转速为200r/min，最适宜温度采用分段控制，发酵前18h控制在36℃，18h后升温至37℃发酵至28h，透明质酸产量较优化前有显著提高。

目录

声明

摘要

第一章 文献综述

1 透明质酸的理化性质及生理功能

1．1 透明质酸的理化性质

1．2 透明质酸的生理功能

2 透明质酸的应用

2．1 透明质酸在保健食品中的应用

2．2 透明质酸在化妆品中的应用

2．3 透明质酸在注射美容方面的应用

2．4 透明质酸在骨科治疗中的应用

2．5 透明质酸在眼科治疗中的应用

2．6 透明质酸在肿瘤治疗方面的应用

2．7 透明质酸在给药体系中的应用

2．8 透明质酸在其他方面的应用

3 透明质酸的生产方法

3．1 动物组织提取法

3．2 微生物发酵法

4 展望

5 本研究的目标、意义

第二章 透明质酸摇瓶发酵条件的优化

引言

1 材料及方法

1．1 材料

1．2 方法

2 结果和分析

2．1 摇瓶发酵温度的优化

2．2 摇瓶发酵pH的优化

2．3 摇瓶发酵时间的优化

2．4 摇瓶发酵装液量的优化

3 结论

3．1 温度对发酵影响分析

3．2 pH对发酵影响分析

3．3 时间对发酵影响分析

3．4 装液量对发酵影响分析

第三章 透明质酸发酵培养基的优化

引言

1 材料和方法

1．1 菌种

1．2 培养基(g／L)

1．3 分析试剂

1．4 实验器材

1．5 培养方法

1．6 测定方法

1．7 菌体量测定

2 结果

2．1 Plackett-Burman试验确定关键因素

2．2 最陡爬坡试验

2．3 响应面法优化HA的发酵培养基

3 结论

第四章 透明质酸小型发酵罐发酵条件的优化

引言

1 材料和方法

1．1 菌种

1．2 培养基(g／L)

1．3 试剂

1．4 实验器材

1．5 培养方法

1．6 测定方法

2 结果与分析

2．1 兽疫链球菌生长曲线

2．2 通气量对HA发酵的影响

2．3 搅拌转速对HA发酵的影响

2．4 温度对HA发酵的影响

3 结论

全文结论

参考文献

致谢

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