猪源肺炎克雷伯氏菌分离菌株耐药性调查及防控技术研究

摘要

肺炎克雷伯氏菌是一种很容产生耐药性的革兰氏阴性杆菌，泛耐药性克雷伯氏菌是“超级细菌”的一种，人医上对肺炎克雷伯氏菌的耐药性研究较多，而兽医上对该细菌还没有足够重视，没有人对肺炎克雷伯氏菌进行过系统的调研。本研究采用传统的生化试验方法对新乡市2012年～2013年间猪源肺炎克雷伯氏菌进行了分离鉴定，并用PCR方法进行了验证。通过药敏试验纸片方法（K-B法）对分离的肺炎克雷伯氏菌进行了耐药性分析，并总结了综合防控猪源肺炎克雷伯氏菌病的实施措施，现将主要研究结果简述如下:
　　1.猪源肺炎克雷伯氏菌分离鉴定
　　采集临床病料进行增菌，然后采用鉴别培养基DHL琼脂和MIAC琼脂对克雷伯氏菌进行初步分离，反复纯化后对细菌进行生化鉴定，最终从82份样品中，鉴定为克雷伯氏菌属的有26株，克雷伯氏菌分离率为31.71％，其中产酸克雷伯氏菌4株，占克雷伯氏菌总数的15.4％;肺炎克雷伯氏菌22株，各亚种数量分别为:肺炎克雷伯氏菌19株，占克雷伯氏菌73.1％;臭鼻克雷伯氏菌2株，占克雷伯氏菌总数的7.7％;鼻硬结克雷伯氏菌1株，占克雷伯氏菌总数的3.8％，未确定种的克雷伯氏菌0株。与卓超等人2009年、2010年报道的关于人感染肺炎克雷伯氏菌的数据比较吻合。
　　2.猪源肺炎克雷伯氏菌耐药性研究
　　为了解新乡市范围内猪源肺炎克雷伯氏菌的耐药情况，采用纸片法（K-B法）对临床分离的菌株进行药敏试验，并对产ESBLs酶和产AmpC酶菌株进行监测。结果临床分离的猪源肺炎克雷伯氏菌22株中，产ESBLs酶的有7株，产AmpC酶的有1株，不产生ESBLs和AmpC酶的14株。未发现耐碳青霉烯类菌株。分离的所有肺炎克雷伯氏菌对一代头孢、磺胺类药物和四环素耐药性较强。其中不产酶菌株对除一代头孢、磺胺类药物和四环素类以外的抗生素均比较敏感，产酶菌株对亚胺培南、氨曲南、多粘菌素B头孢吡肟以及头孢联合酶抑制剂的药物还有效。与人医相的结果比较吻合。
　　3.猪源肺炎克雷伯氏菌综合防控研究
　　通过克雷伯氏菌灭活疫苗试验证明了免疫可以很好的控制猪肺炎克雷伯氏菌病的流行，通过比较，经验治疗和药敏试验筛选药物治疗的结果，证明药敏试验在临床应用的重要性。最后总结归纳出了防控猪肺炎克雷伯氏菌病的综合措施。以上研究为防控猪肺炎克雷伯氏菌病提供了数据资料和技术指导。
　　4.结论
　　研究表明，肺炎克雷伯菌在猪体内确实存在。产ESBLs酶和AmpC酶肺炎克雷伯菌已证实可以在猪体内分离到。本研究对于预防和控制猪肺炎克雷伯菌病进行了一些初步的调查和研究，为兽医工作者防控该病提供一些基础数据。

目录

声明

摘要

符号说明

第一章 肺炎克雷伯氏菌研究进展

1 克雷伯氏菌概况

2 猪源肺炎克雷伯氏菌病流行特征

3 肺炎克雷伯氏菌生化特性

4 肺炎克雷伯氏菌培养基

5 肺炎克雷伯氏菌耐药机理及耐药程度报道

6 肺炎克雷伯氏菌免疫原性

7 小结

参考文献

第二章 猪源肺炎克雷伯氏菌分离鉴定

1 材料与方法

1．1 材料

1．2 方法

2 结果

3 讨论

参考文献

第三章 猪源肺炎克雷伯氏菌药敏试验

1 材料与方法

1．1 材料

1．2 方法

2 结果

3 讨论

参考文献

第四章 猪源肺炎克雷伯氏菌防控技术研究

1 材料与方法

1．1 材料

1．2 方法

2 结果

3 讨论

参考文献

全文总结

附录

致谢