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大豆耐逆候选基因GmZFP2的功能分析及IPT基因对大豆外植体再生率和遗传转化率的影响

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第一章文献综述

1锌指蛋白的研究进展

1.1锌指蛋白

1.2 C2H2型锌指蛋白

2大豆遗传转化方法

2.1花粉管通道法

2.2基因枪法

2.3农杆菌介导法

2.4影响农杆菌介导大豆遗传转化效率的因素

3植物细胞分裂素的研究进展

3.1细胞分裂素的发现及生物学功能

3.2细胞分裂素的生物合成

3.3细胞分裂素的代谢

3.4细胞分裂素的受体

3.5IPT基因在植物生长发育中的作用

3.6IPT基因在植物遗传转化中的作用

4研究的目的、意义及主要内容

4.1本研究的目的和意义

4.2本研究的主要内容

5本研究的技术路线图

5.1 GmZFP2基因的克隆和功能分析

5.2植物过表达载体pCAMBIA3301-35S:IPT的构建和对大豆遗传转化的影响

第二章大豆耐逆候选基因GmZFP2的功能分析

1材料与试剂

1.1植物材料

1.2载体和菌株

1.3工具酶和主要试剂

1.4常用储液和配制方法

1.5 PCR引物

1.6实验仪器设备

2实验方法

2.1大豆GmZFP2基因的克隆

2.2大豆GmZFP2基因及其编码蛋白的生物信息学分析

2.3 GmZFP2基因在不同胁迫下的表达分析

2.4亚细胞定位

2.5发根载体pBinGFP4-35S:GmZFP2的构建及对大豆的转化

2.6植物过表达载体pBA002-35S:GmZFP2的构建和对大豆的遗传转化

3结果与分析

3.1大豆GmZFP2基因的克隆

3.2大豆GmZFP2基因及其编码蛋白的生物信息学分析

3.3 GmZFP2基因在不同胁迫下的表达分析

3.4 GmZFP2蛋白的亚细胞定位

3.5发根载体pBinGFP4-35S:GmZFP2的构建及对大豆的转化

3.6植物过表达载体pBA002-35S:GmZFP2的构建和对大豆的遗传转化

3.7过表达GmZFP2基因的转基因阳性大豆植株的获得

4讨论

第三章IPT基因对大豆外植体再生率和遗传转化率的影响

1材料与试剂

1.1实验材料

1.2实验试剂

1.3实验仪器设备

2实验方法

2.1中间载体pCAMBIA3301-35S的构建

2.2目的基因IPT的获得

2.3植物双元表达载体pCAMBIA3301-35S:IPT的构建

2.4转化根癌农杆菌

2.5农杆菌介导的大豆子叶节转化

3结果与分析

3.1植物双元表达载体pCAMBIA3301-35S:IPT的构建

3.2农杆菌介导的大豆遗传转化

4讨论

全文结论

本研究的创新之处

参考文献

附录

攻读硕士学位期间发表的学术论文

致谢

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