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摘要
缩略语中英文对照表
第一章let-7基因功能研究进展
1 let-7家族特征
1．3 let-7的产生
1．4 let-7序列特点
2 let-7生物学功能
2．2 let-7在果蝇中的功能
2．3 let-7在脊椎动物中的功能
2．4 let-7与早期发育
2．5 let-7与癌症
2．6 let-7与神经系统
2．7 let-7与心肌功能
3 let-7的表达调控
3．3 Lin28对let-7的负调控
第二章细胞凋亡研究进展
1细胞凋亡概述
1．1细胞凋亡形态及生化变化
1．2细胞凋亡途径
1．3细胞凋亡相关蛋白
1．4细胞凋亡的检测方法
2细胞凋亡的作用
2．1细胞凋亡与形态发生
2．2细胞凋亡与个体发育
2．3细胞凋亡与器官功能
3细胞凋亡与卵泡闭锁关系研究
3．1卵泡发育及闭锁
3．2颗粒细胞凋亡与卵泡闭锁
3．3卵泡颗粒细胞凋亡的调控
第三章自噬的过程、调控及其功能研究
1自噬概述
1．1自噬的定义
1．2自噬的分类
1．3自噬的形态学过程
1．4自噬的发生机理
2自噬的调控
2．1自噬的转录调控
2．2自噬的转录后调控
2．3自噬的翻译后调控
3自噬的功能
3．1降解产物的利用
3．2大分子蛋白和细胞器的清除
3．3从细胞质到溶酶体／内涵体
3．4隔离／打包
第四章let-7g通过靶向TGFBR1调控猪卵泡颗粒细胞的凋亡
1引言
2材料与方法
2．2细胞培养
2．3 miRNA转染
2．4凋亡检测
2．5 RNA的提取
2．6 cDNA的反转录
2．7实时荧光定量PCR(Quantitative Real Time PCR，qRT-PCR)
2．8 Caspase-3活性检测
2．9质粒的构建
2．10荧光素酶活性检测
2．11 Western blot
2．12 siRNA干扰
2．13 TGF-β1处理细胞及miRNA定量
2．14数据分析
3试验结果
3．2 let-7g促进猪颗粒细胞凋亡
3．3 TGFBR1是let-7g靶基因
3．4 let-7g在颗粒细胞中下调TGFBR1
3．5敲减TGFBR1之后，颗粒细胞凋亡率上升
3．6 let-7g通过靶向TGFBR1调控颗粒细胞凋亡
3．7 let-7g在颗粒细胞中调控TGFβ信号通路
3．8 let-7g的表达受TGF-β1的调控
4讨论
参考文献
第五章let-7g通过调控IGF1R诱导小鼠颗粒细胞自噬
1引言
2材料与方法
2．1细胞培养
2．2质粒构建
2．3转染
2．4 GFP-LC3荧光及MDC标记检测
2．5 Western blot及抗体
2．6 qRT-PCR检测
2．7双荧光素酶活性检测
2．8 TUNEL检测
2．9 CCK8检测
2．10细胞凋亡检测
2．11数据分析
3试验结果
3．2 let-7g靶向IGF1R
3．3敲减IGF1R促进细胞自噬
3．4 let-7g下调IGF1R／Akt／mTOR信号通路
3．5过表达IGF1R可以抑制let-7g诱导的自噬
3．6 let-79诱导的自噬参与到了细胞凋亡过程
4讨论
参考文献
第六章FSH通过HIF-1α上调小鼠颗粒细胞自噬
1引言
2材料与方法
2．1实验动物处理
2．2免疫组化
2．3 Western blot及抗体
2．4 qRT-PCR检测
2．5 CCK8检测
2．6细胞内ROS活性检测
2．7细胞内AMPK活性检测
2．8小鼠原代颗粒细胞培养
2．9细胞转染
3．1 FSH促进小鼠颗粒细胞自噬
3．2 FSH通过Akt／mTOR信号通路调控细胞自噬
3．3 FSH上调颗粒细胞中HIF-1α，AMPK的水平
3．4 HIF-1α是FSH调控自噬的关键因子
3．5 FSH在体外上调HIF-1α调控自噬活性
3．6敲减HIF-1α，Beclin1，Bnip3缓解FSH上调的自噬活性
3．7颗粒细胞中的自噬与卵泡发育相关
4讨论
参考文献
全文结论
创新
致谢
攻读博士学位期间发表的论文
附录
