辣椒素受体中介染料木黄酮缺血后处理对再灌注大鼠胃黏膜的保护作用

摘要

目的:探讨染料木黄酮genistein 缺血后处理对再灌注大鼠胃黏膜的保护作用的机制及辣椒素受体在其保护机制中的作用。
　　 方法：本实验采用健康Sprague-Dawley 大鼠采用夹闭大鼠腹腔动脉30 min松开动脉夹血流复灌1 h的胃缺血-再灌注(GI-R) 模型在此损伤模型基础上于再灌注前5 min 静脉注射低剂量的染料木黄酮(Geni)作为缺血后处理观察其对大鼠GI-R 后胃黏膜损伤指数和细胞增殖凋亡相关因子的表达变化于缺血前静脉给予辣椒素受体特异阻断剂Capsaizepine, CPZ或CGRP 受体阻断剂CGRP8-37 或每天一次连续四次皮下给予大量辣椒素记录各组胃黏膜损伤指数并检测胃黏膜丙二醛(MDA) 含量超氧化物歧化酶(SOD)的活性变化并采用RT-PCR 和Western blot 方法检测CGRP 在背根神经节及胃黏膜的表达水平变化于缺血后处理前给予PKC 拮抗剂Chelerythrine 与PI3K 拮抗剂LY294002 以初步探讨染料木黄酮缺血后处理保护效应的分子机制。
　　 结果：
　　 1.低剂量的染料木黄酮缺血后处理对再灌注胃黏膜有明显的保护效应尤其以500ìg/kg 的剂量最为显著其胃黏膜损伤指数及细胞凋亡率显著降低。
　　 2.缺血前给予辣椒素受体特异阻断剂或皮下给予大量辣椒素均可阻断染料木黄酮缺血后处理的保护效应。
　　 3.缺血前给予CGRP 拮抗剂CGRP8-37可阻断染料木黄酮缺血后处理的保护效应RT-PCR 和Western blots 结果亦表明CGRP 在染料木黄酮缺血后处理组的胃黏膜与背根神经节内表达增加而没有在辣椒素受体特异阻断剂capsazepine 和大量的辣椒素组。
　　 4.PKC 拮抗剂与PI3K拮抗剂可拮抗染料木黄酮缺血后处理的保护作用Western blots 结果发现染料木黄酮缺血后处理组的p-Akt 表达量显著高于其他组表明PKC-PI3K-Akt 信号通路在后处理保护效应中起重要作用。
　　 5.与单纯缺血-再灌注组相比染料木黄酮后处理后胃黏膜MDA 含量显著降低,而SOD 活性明显升高具有抗氧化作用。
　　 结论：结果表明染料木黄酮缺血后处理对再灌注胃黏膜有显著的保护效应辣椒素受体中介了其保护效应并进一步促进了对辣椒素敏感的感觉神经元及部分胃黏膜细胞合成释放内源性CGRP 增加通过PKC-PI3K-Akt 信号通路发挥了抗胃黏膜再灌注损伤的保护作用另外染料木黄酮缺血后处理具有抗氧化作用可减少再灌注后氧自由基的产生抑制胃黏膜细胞膜脂质过氧化抑制细胞凋亡促进细胞增殖。