CIK累赘胞联合顺铂对胃癌耐顺铂细胞株SCC-7901/DDP的体外杀伤作用的实验研究

摘要

目的：探讨细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer, CIK)联合顺铂对胃癌耐顺铂细胞株的体外杀伤作用。
　　 方法：
　　 ①利用体外培养胃癌耐顺铂细胞株SGC-7901/DDP，采用MTT比色法观察不同浓度的CIK细胞、顺铂以及两者联合对胃癌耐顺铂细胞株的生长抑制作用；
　　 ②利用RT-PCR法检测CIK细胞及CIK细胞联合顺铂作用后其耐药基因（multidrug resistance gene1, mdr-1）的表达情况；
　　 ③利用Western blot法检测CIK细胞及CIK细胞联合顺铂作用后其耐药蛋白(p-glycoprotein, P-gp)的表达情况。
　　 结果：
　　 ①MTT法观察到单独应用DDP后，SGC-7901/DDP细胞生长抑制率明显低于SGC-7901细胞，IC50为33.42μg/ml,RI为1.73。单独应用CIK细胞后，随其效靶比的增大，对SGC-7901/DDP细胞的抑制呈上升趋势，与SGC-7901细胞相比，有统计学意义(P＜0.05)。联合用药后，使SGC-7901/DDP的生长明显受到抑制，上升趋势更加明显(P＜0.05)，杀伤率最大达（86.11±0.65）％。同时，DDP对SGC-7901/DDP细胞的IC50为23.78μg/ml,RF为1.41。
　　 ②RT-PCR法显示，单独使用CIK细胞后，mdr-1基因mRNA的表达下降，且随着效靶比的增大而降低，最大效靶比(20：1)时，mRNA表达量为(o.64±0.07)，下降约22％，与SGC-7901/DDP细胞相比，有统计学意义(P＜0.05)。联合用药后，mdr-1基因mRNA的表达进一步下降，联合80μg/mlDDP时，mRNA表达量为(0.41±0.03)，下降约44％。
　　 ③Western blot法显示，CIK细胞组、CIK细胞联合DDP组P-gp蛋白量表达减少，联合用药后细胞P-gp蛋白的表达较单独用药组下降，与单独用药组比较，具有统计学意义(P＜0.05)。
　　 结论：CIK细胞和顺铂的联合应用可以使胃癌耐顺铂细胞株SGC-7901/DDP的生长受到明显抑制，杀伤作用明显增加，且下调了mdr-1 mRNA及P-gp的表达，从而协同地增加了DDP对SGC-7901/DDP的敏感性。对临床应用CIK细胞联合化疗药物对耐药性胃癌的治疗提供了一定的实验依据和参考价值。

目录

文摘

英文文摘

缩略词表

前言

材料和方法

1 材料

2 方法

结果

讨论

结论

论文图片

参考文献

综述 树突状细胞在肿瘤免疫治疗中的应用进展

参考文献

综述 树突状细胞在肿瘤免疫治疗中的应用进展

参考文献

攻读硕士学位期间发表学术论文题目

临床培训小结

致谢