鞘内注射神经干细胞数量对坐骨神经半切断大鼠神经病理性疼痛的影响

摘要

目的：观察不同数量神经干细胞(NSCs)鞘内注射对坐骨神经半切断(PST)大鼠神经病理性疼痛行为；及脊髓背角、背根神经节(DRG)脑源性神经营养因子(BDNF)和胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)表达变化的影响，旨在探讨NSCs移植治疗神经病理性疼痛的适宜移植剂量，探讨其可能机制。
　　 方法：84只成年雄性SD大鼠随机分成7组(n=12)：Ⅰ．假手术组(Sham)Ⅱ.模型组(PST)Ⅲ.PST+NSCs(1×103)Ⅳ.PST+NSCs(1×104)V.PST+NSCs(1×105)Ⅵ．PST+NSCs(1×106)Ⅶ.PST+NSCs(1×107)，制作模型，Ⅰ组只暴露右侧坐骨神经，不切断，Ⅱ至Ⅶ组大鼠制作右侧PST模型，术后3天，Ⅰ、Ⅱ组鞘内注射培养基30ul，Ⅲ至Ⅶ组鞘内注射NSCs30ul，其细胞数量分别为1×103、1×104、1×105、1×106、1×107，术前1d，术后1、3、7、14、21d随即取6只大鼠测同侧足机械缩足阈值(mechanical withdrawl threshold，MWT)和热缩足潜伏期(thermal withdrawal latency，TWL);术后7d和21d测痛阈后分别取6只大鼠，采用免疫组织化学染色和real-time PCR技术检测同侧腰膨大脊髓背角及L5DRG的BDNF、GDNF的表达变化。
　　 数据以均数±标准差(x±s)表示，采用SPSS16.0统计软件处理。机械缩足阈值、热缩足潜伏期、GDNF、BDNF mRNA及蛋白表达，组内比较采用双因素方差分析，组间比较采用单因素方差分析，P＜0.05，为差异有统计学意义。
　　 结果：1．与Ⅰ组比较，Ⅱ至Ⅶ组术后1、3、7、14d痛阈下降(P＜0.05)，7至14d阈值最低，术后21d，Ⅱ至Ⅳ组阈值低于Ⅰ组(P＜0.05)，Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ组与其差异无统计学意义；与Ⅱ组比较，Ⅲ组与其无统计学差异（P＞0.05），Ⅳ至Ⅶ组，术后7、14、21d，痛阈增高(P＜0.05)；与Ⅶ组比较，术后7天，Ⅰ至Ⅵ组与其差异均有统计学意义(P＜0.05)，术后14、21d，Ⅴ、Ⅵ组与其比较无统计学差异，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组与其比较，阈值低，差异有统计学意义(P＜0.05);
　　 2．术后7天，脊髓背角及DRG的BDNF、GDNF表达量，随着移植量的增加逐渐增加，与Ⅶ组比较，Ⅰ至Ⅵ组与其有统计学差异（P＜0.05）；术后21d，第V组脊髓背角、DRG的GDNF表达量最高，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅵ、Ⅶ组与其比较，差异有统计学意义（P＜0.05），而BDNF的表达量，Ⅰ至Ⅳ组表达量低，与第V组比较有统计学差异（P＜0.05），Ⅵ、Ⅶ表达量与其比较差异无统计学意义（P＞0.05）。
　　 结论：鞘内注射1×105的NSCs移植量，能最有效改善PST大鼠神经病理性疼痛行为，与大鼠脊髓背角、DRG的BDNF及GDNF的表达变化一致。

目录

文摘

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前言

材料和方法

1 材料

2 方法

结果

讨论

结论

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参考文献

慢性痛基因治疗的的载体—HSV-1 综述

参考文献

临床培训小结

攻读硕士学位期间发表学术论文

致谢