大黄素—聚乳酸—羟基乙酸共聚物纳米粒对5/6肾切除大鼠残余肾脏保护作用的研究

摘要

文章主要从以下几方面进行了论述。
　　第一部分大黄素-聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米粒的制备及检测。
　　目的：制备大黄素-聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米粒(Emodin-polylactic-co-glycolic acid nanop-articles，EMD-PLGA NPs)，观察其电镜形态、稳定性，测定粒径、包封率、载药量。
　　方法:采用乳化-溶剂挥发法(Emulsion solvent evaporation method)制备EMD-PLGA NPs并按照正交设计优化处方，透射电镜下观察纳米粒的外观形态，激光粒度仪检测纳米粒的大小、分布及zeta电位，沉降法观察稳定性，用紫外分光度计测量EMD-PLGA NPs的吸光光度以计算包封率、载药量。
　　结果:得到最佳优化处方工艺条件，在最佳条件下制得EMD-PLGA NPs呈圆球状或椭圆状;粒径约(100±50) nm左右;分散体系的颗粒由上而下呈逐渐变淡的弥散分布，无明显的沉积物;包封率为（24.5±1.9）％，载药量为(18.9±3.4)％。
　　结论:属国内外首次采用乳化-溶剂挥发法制备EMD-PLGA NPs，该制备方法材料简单，便于操作，优于以往的固体脂质纳米粒法;制备的EMD-PLGA NPs粒径小、分布均匀、载药率较高，药物吸光度及稳定性等均符合要求。为进一步制备组织靶向药物的研究奠定了基础。
　　第二部分 EMD-PLGA NPs对5/6肾切除大鼠肾组织TGF-β1、CTGF干预的研究。
　　目的:探讨大黄素-聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米粒(Emodin-polylactic-co-glycolic acid nanoparticles，EMD-PLGA NPs)对5/6肾切除大鼠残余肾组织的保护作用及可能的机制。
　　方法:40只清洁级雄性SD大鼠随机分为假手术组10只（Sham组）、造模组30只。造模成功24只，然后随机分为模型组8只（Model组）、大黄素组8只(EMD组)、纳米粒组8只(NPs组)，实验期间检测大鼠24h尿蛋白定量、血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)，实验结束时光镜观察残余肾组织病理变化，并分别采用免疫组织化学法和RT-PCR法检测肾组织转化生长因子-β1(TGF-β1)及结缔组织生长因子(CTGF)表达。
　　结果:给药后2、4、6、8周，NPs组24h尿蛋白定量分别为（8.507±0.391）mg、（12.818±0.416）mg、（50.462±0.385）mg、(80.281±0.946) mg，与Model组、EMD组比较尿蛋白定量下降(P＜0.01);给药后4、8周，与Model组、EMD组比较，NPs组血尿素氮(15.331±0.288)mmol/L、(19.273±0.339)mmol/L，血肌酐(80.950±2.213)μmol/L、（100.470±2.813）μmol/L水平降低(P＜0.01);病理HE染色显示NPs组较Model组肾脏病理损害轻;免疫组织化学、RT-PCR结果显示，与Model组、EMD组比较，NPs组TGF-β1、CTGF在肾组织的表达差异具有统计学意义(P＜0.01)。
　　结论:EMD-PLGA NPs较普通EMD降低尿蛋白定量、BUN、SCr效果好，并且可能是通过下调TGF-β1、CTGF的表达而发挥肾脏保护作用，能更好地延缓肾病慢性进展。

目录

研究生个人简介

缩略词表

摘要

第一部分 大黄素-聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米粒的制备及检测

前言

材料和方法

1 材料

2 方法

结果

讨论

结论

第二部分 EMD-PLGA NPs对5／6肾切除大鼠肾组织TGF-β1、CTGF干预的研究

前言

材料和方法

1 材料

2 方法

结果

讨论

结论

参考文献

载药纳米粒的研究进展

攻读硕士学位期间发表学术论文

临床培训小结

致谢

声明

论文审阅认定书