APP/PS1双转基因AD模型小鼠肝叶部分切除术后认知功能及海马内Cdk5、p25、p35表达的变化

摘要

目的：观察肝叶部分切除术后APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(Alzheimer'sdisease，AD)模型小鼠认知功能的变化，探讨其与海马Cdk5、p25和p35表达的关系。
　　方法：3月龄APP/PS1双转基因小鼠采用随机数字表法随机分为5组:无干预对照组（M组）;麻醉组（A组）小鼠腹腔注射1％戊巴比妥(30 mg/kg-50 mg/kg);手术组（S组）麻醉后行肝叶部分切除术;雷公藤红素组（C组）肝叶部分切除+雷公藤红素溶于二甲亚砜腹腔注射;二甲亚砜组（O组）肝叶部分切除+二甲亚砜腹腔注射。每组8只APP/PS1双转基因小鼠和8只野生型小鼠采用Morris水迷宫连续训练5天并检测干预后第1、3、7、14天学习记忆能力。每组32只APP/PS1双转基因小鼠在干预后第1、3、7、14天时间点取标本，采用免疫组织化学法及免疫印迹法对各组小鼠海马内Cdk5、p35和p25蛋白的表达进行检测，每个时间点处理8只，4只用于免疫组化检测，4只用于免疫印迹检测。
　　结果：随着训练天数的延长，3月龄APP/PS1双转基因AD模型小鼠与野生型小鼠平均逃避潜伏期逐渐缩短，两组差异无统计学意义(P＞0.05)。对照组和麻醉组在干预后第1、3、7、14天平均逃避潜伏期的差异无统计学意义(P＞0.05);手术组干预后第3、7、14天的平均逃避潜伏期和上台前路程较对照组延长(P＜0.05);手术组干预后第3、7、14天的平均逃避潜伏期和上台前路程较麻醉组延长(P＜0.05);手术组干预后第3、7、14天的平均逃避潜伏期和上台前路程较雷公藤红素组延长（P＜0.05）;雷公藤红素组干预后第3、7、14天的平均逃避潜伏期和上台前路程较二甲亚砜组缩短(P＜0.05);各组之间平均运动速度差异无统计学意义(P＞0.05)。空间探索实验结果显示:对照组和麻醉组干预后第1、3、7、14天目的象限时间百分比差异无统计学(P＞0.05);手术组干预后第3、7、14天目的象限时间百分比相对于对照组和麻醉组均下降(P＜0.05);手术组干预后第3、7、14天目的象限时间百分比相对于雷公藤红素组下降(P＜0.05);雷公藤红素组干预后第3、7、14天目的象限时间百分比相对于二甲亚砜组增加(P＜0.05）。
　　免疫印迹结果显示:对照组和麻醉组干预后1、3、7、14天小鼠海马内Cdk5蛋白表达的差异无统计学意义(P＞0.05）;手术组干预后第3、7、14天小鼠海马内Cdk5蛋白的表达较对照组明显升高（P＜0.01）;手术组干预后第3、7、14天小鼠海马内Cdk5蛋白的表达较麻醉组明显升高(P＜0.01）;手术组干预后第3、7、14天小鼠海马内Cdk5蛋白的表达较雷公藤红素组升高明显(P＜0.01);雷公藤红素组干预后第3、7、14天小鼠海马内Cdk5蛋白的表达较二甲亚砜组明显降低(P＜0.01)。对照组和麻醉组干预后第1、3、7、14天小鼠海马内p25蛋白表达的差异无统计学意义(P＞0.05);手术组干预后第1、3、7、14天小鼠海马内p25蛋白的表达较对照组明显升高(P＜0.01）;手术组干预后第1、3、7、14天小鼠海马内p25蛋白的表达较麻醉组明显升高(P＜0.01);手术组干预后第1、3、7、14天小鼠海马内p25蛋白的表达较雷公藤红素组明显升高(P＜0.01);雷公藤红素组干预后第1、3、7、14天小鼠海马内p25蛋白的表达较二甲亚砜组下降明显(P＜0.01)。
　　Cdk5免疫组化染色切片数码图片IOD值统计分析显示:对照组和麻醉组干预后第1、3、7、14天小鼠海马内Cdk5阳性细胞的表达差异无统计学意义(P＞0.05);手术组干预后第3、7、14天海马内Cdk5阳性细胞的表达较对照组和麻醉组均明显增多(P＜0.01);雷公藤红素组干预后第3、7、14天小鼠海马内Cdk5阳性细胞的表达较手术组和二甲亚砜组均明显下降(P＜0.01）。
　　结论：APP/PS1双转基因AD模型小鼠肝叶部分切除术后出现学习记忆能力的下降，其机制可能与海马内Cdk5/p25表达的上调有关。雷公藤红素可以改善APP/PS1双转基因AD模型小鼠肝叶部分切除术后的认知功能，其机制可能与CdkS/p25蛋白表达下调有关。

目录

研究生个人简介

缩略词表

摘要

前言

材料和方法

1．材科

2．方法

结果

讨论

结论

参考文献

综述 Cdk5与突触可塑性的研究进展

攻读硕士学位期间发表学术论文

临床培训小结

致谢

声明

论文审阅认定书