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【6h】

法舒地尔治疗成年BALB/c小鼠巨细胞病毒性心肌炎的实验研究

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1 材料

2 方法

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巨细胞病毒性心肌炎的诊断与治疗 综述

攻读硕士学位期间发表学术论文

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摘要

目的:观察病毒性心肌炎BALB/c小鼠心脏组织中γ干扰素(IFN-γ)、白介素-6(IL-6)、MCMV-DNA水平的变化,结合心脏组织病理学结构,探讨盐酸法舒地尔对巨细胞病毒性心肌炎小鼠的影响。
  方法:60只成年BALB/c小鼠(6-8周,MCMV检测阴为性)随机分7组:A.空白对照组;B.环磷酰胺组;C.环磷酰胺+MCMV组;D.环磷酰胺+MCMV+生理盐水组;E.环磷酰胺+MCMV+法舒地尔治疗组;F环磷酰胺+MCMV+更昔洛韦治疗组;G.环磷酰胺+MCMV+热毒宁治疗组。各组又按照不同的时间点分为感染病毒后第一天开始治疗与感染病后第五天开始治疗两个亚组,在各时间点取心脏组织行实时定量聚合酶链反应(PCR)检测病毒DNA的表达,采用酶联免疫吸附试验(ELASA)法测定心脏组织中IL-6、IFN-γ的浓度;实验结束后统一取小鼠的心脏组织做病理切片HE染色,观察不同组小鼠心脏组织其病理改变。
  结果:1.A、B两组的IFN-γ、IL-6无统计学意义,(P>0.05);C、D两组的IFN-γ、IL-6无统计学意义,(P>0.05);C、D组的IFN-γ水平较A组下降了34.86%、30.69%(P<0.05),IL-6升高了近1.28倍、1.27倍(P<0.05),说明在感染巨细胞病毒后,心肌细胞的IFN-γ的表达量下调,IL-6表达量升高,差异均有统计学意义;E、F、G组IFN-γ有上升,提示经治疗后IFN-γ都有上调;E、F、G组的IL-6较C组降低,提示经治疗后IL-6有下降。E、F、G组各亚组的IFN-γ、IL-6相比较差异无统计学意义(P>0.05)。
  2.阈值循环(Threshold Cycle,△CT)是扩增曲线和阈值线的交叉点,它是PCR反应中模板浓度的相对测量,△CT值与模板浓度负相关。C组的△CT值最小,说明MCMV-DNA的模板浓度最大,提示病毒复制最活跃;与C组比较,E、F、G组的△CT值有所增加,差别有显著性(P<0.05),提示经治疗后,MCMV-DNA的浓度显著下降;两个亚组间进行比较(P<0.05),提示第一天进行治疗比第五天进行治疗MCMV-DNA的浓度显著下降。
  3.病理组织学改变正常的心肌细胞排列组未见明显病理改变;MCMV模型组(C组)为心肌炎症表现,心肌细胞肿胀,细胞横纹不清,周围出现单核细胞及淋巴细胞为主的炎性细胞浸润,上述病理改变符合MCMV病毒性心肌炎的表现,结合小鼠的行为学表现,模型建立成功;E、F、G及其亚组心肌细胞炎症(单核细胞数减少)较C组有减轻。
  结论:巨细胞病毒性心肌炎小鼠心脏组织MCMV-DNA水平、L-6、IFN-γ浓度升高,法舒地尔能降低其升高的幅度,对巨细胞病毒性心肌炎小鼠可能有保护作用。病理其机制还需进一步研究。

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