X-射线对肺癌细胞XRCC1、XRCC2和XRCC3表达水平的影响

摘要

目的：研究X—射线对肺癌细胞X线修复交叉互补基因1(XRCC1)，XRCC2和XRCC3表达的影响，探讨DNA碱基切除修复机制和同源重组修复机制在肺癌细胞对放疗耐受中的可能作用。 方法：体外培养肺癌细胞A549，以噻唑蓝(MTT)法检测不同剂量X—射线处理后细胞抑制率的变化；在用不同剂量X—射线处理A549细胞不同时间段，收集细胞，提取RNA，采用实时荧光定量RT—PCR技术(realtimeRT—PCR)分别检测XRCC1，XRCC2和XRCC3mRNA相对表达水平，分析X—射线对肺癌细胞A549上述基因mRNA相对表达水平的影响。 结果：肺癌细胞抑制率多数情况下随X—射线照射时间的延长及照射剂量的增大，细胞增殖抑制率增加，呈照射时间依赖性(P＜0.05)和剂量依赖性(P＜0.05)，仅16Gy组和32Gy组之间比较无统计学意义(P=0.211)。X—射线照射后肺癌细胞XRCC1，XRCC2和XRCC3mRNA的相对表达水平均先增高后降低。XRCC1mRNA4Gy组和8Gy组在72小时相对表达水平最高(P＜0.05)，16Gy组和32Gy组在48小时相对表达水平最高(P＜0.05)。XRCC2与XRCC3mRNA在照射后48h相对表达水平达高峰(P＜0.05)，且随着照射剂量的增大，XRCC2和XRCC3mRNA的相对表达水平也随之增加(P＜0.05)。 结论：X—射线照射可引起肺癌细胞XRCC1，XRCC2和XRCC3mRNA相对表达水平的明显改变，表明DNA碱基切除修复机制和同源重组修复机制在肺癌细胞对放疗耐受中起着重要的作用。

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文摘

英文文摘

声明

第一章绪论

1.1 前言

1.2本论文研究目的、内容、方法、实验方案的设计和意义

1.2.1 研究目的

1.2.2研究的主要内容和方法

1.2.3实验方案的设计

1.2.4研究的意义

第二章 X-射线对肺癌细胞A549抑制率的影响

2.1材料与方法

2.1.1 标本来源

2.1.2主要仪器和试剂

2.1.3实验步骤

2.1.4 统计学分析

2.2结果

第三章X-射线对肺癌细胞A549 XRCC1 mRNA相对表达水平的影响

3.1材料与方法

3.1.1标本处理与收集

3.1.2主要仪器和试剂

3.1.3实验步骤

3.1.4统计学分析

3.2结果

3.2.1 XRCC1基因PCR反应扩增曲线，溶解曲线

3.2.2 X-射线对肺癌细胞A549 XRCC1 mRNA相对表达水平的影响

第四章X-射线对肺癌细胞A549 XRCC2 mRNA相对表达水平的影响

4.1材料与方法

4.1.1标本来源与收集、总RNA提取和逆转录参见第三章

4.1.2引物设计

4.1.3 PCR扩增

4.2结果

4.2.1 XRCC2基因PCR反应扩增曲线，溶解曲线

4.2.2 X-射线对肺癌细胞A549 XRCC2 mRNA相对表达水平的影响

第五章X-射线对肺癌细胞A549 XRCC3 mRNA相对表达水平的影响

5.1材料与方法

5.1.1 标本来源与收集、总RNA提取和逆转录参见第三章

5.1.2引物设计

5.1.3 PCR扩增

5.1.4 结果计算

5.1.5 统计学分析

5.2 结果

5.2.1 XRCC3基因PCR反应扩增曲线，溶解曲线

5.2.2 X-射线对肺癌细胞A549 XRCC3 mRNA相对表达水平的影响

讨论

结论与展望

参考文献

综述　XPCC1和肺癌

致谢

攻读硕士学位期间发表的文章