大鼠双下肢挤压伤模型生化指标与病理变化分析

摘要

目的:探讨实验用大鼠在相同重量挤压条件下，经历不同挤压时间，并在解除挤压后特定时间内，缺血组织血液再灌注后分别对物理、病理、生化等指标的不同影响，并根据指标变化判断此挤压伤综合征动物模型的成功与否。
　　方法:实验采用某机械公司生产的大鼠双下肢挤压伤模具，按实验目的配置了大鼠固定台、连接柱以及承重板等。采用随机数字法，将48只健康Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为实验组（n=40只）和对照组（n=8只）。将实验组大鼠固定后，将10kg重的标准砝码一次性瞬间加于承重板，按照预设定的时间持续进行压迫。实验过程中大鼠不给予进食、饮水，不作麻醉，正常呼吸空气。对照组大鼠不作任何处理。实验组中，各取8只大鼠分别挤压3、6、12、24、48 h，共40只，肉眼观察SD大鼠的存活与双下肢活动，通过挤压伤模具的排泄孔观察大鼠有无血尿发生。大体观察后，在解除压迫后4h将各时间点实验组大鼠在不作麻醉的情况下，用硬质长颈玻璃滴管（长3～4cm、毛细管内径0.5～1.0mm）直接通过大鼠眼内眦眼眶静脉丛采血约2～3ml后，离心机(2000rpm)离心20min，接着将上层血清吸出，用全自动生化分析仪检测以下生化指标:反映心肌损伤指标的CK含量，反映肝功能指标的ALT和AST含量和反映肾功能指标的K+、Cr、BUN含量。对照组的采血和检测方法同实验组。SD大鼠眼内眦采血后即做断颈处死处理，取处死大鼠肾脏、心脏和受压部位肌肉等组织标本，将取材后的标本固定（4％多聚甲醛缓冲液），并通过修剪、脱脂、石蜡包埋、5um切片，苏木精-伊红（HE）染色等处理，将染色后肌肉、肾脏、心脏组织切片在x200光镜下观察其病理改变。
　　结果:实验组大鼠解除压迫之后，双下肢明显肿胀，不能如挤压前正常活动。受压部位肌肉组织解剖后可见肌肉水肿，颜色苍白，肌肉的颜色随着挤压时间的延长渐呈暗红色，并渗出淡红色液体。实验组挤压3h大鼠未发生血尿，6h有2只(25.0％)、12h有3只(37.5％)、24h有3只(37.5％)、48h有5只(62.5％)发生血尿。(x2=7.52，P＞0.05)。指标Cr，K+的组间比较均无统计学差异（均P＞0.05）;实验组3h、6h、24h、48h亚组ALT，各时间点亚组的AST，在3h、24h、48h亚组的BUN，以及24h、48h业组的CK均显著高于对照组(均P＜0.05)。压迫解除4小时后，各组受压卜肢肿胀程度不同，用肿胀最严重部位的周径作为组间比较标准，各组间均未出现统计学差异（均P＞0.05）。对照组:细胞完整，呈现正常的肌肉纤维结构，横纹纹理清晰。实验组受压的局部肌肉组织发生病理学改变:3h组血管扩张并发生充血，受压肌肉组织出现轻度水肿，部分肌纤维表现为轻度肿胀及分离;24h组局部受压肌肉可见肌纤维明显肿胀，横纹纹理模糊甚至消失，并呈现局灶性或弥漫性坏死;48 h组局部受压肌肉肌纤维间质水肿，炎性细胞浸润明显，部分肌纤维发生断裂或碎裂，横纹、细胞核消失，细胞质呈匀质化。对照组:镜下肾小管的上皮细胞完整，管腔中未见管型;肾小球结构正常。实验组镜下肾脏组织发生病理学改变:3h组肾小球肿胀充血，间质中毛细血管发生扩张和充血，有红细胞积聚在部分毛细血管内。挤压12h组未见肾小球结构，肾小管间存在散在出血;24h组可见毛细血管扩张充血;48h组镜下可见肾小管上皮细胞发生水肿、脱落、坏死，坏死改变最明显部位为集合管和髓袢升段远曲小管，管型物质（细胞成分、均质物质等）亦在大部分远曲小管中出现。对照组:心肌细胞完整，纤维结构正常，横纹纹理清晰。实验组心肌病理学镜下未见明显改变:各时间点心肌结构与对照组相比无明显变化。
　　结论:反映肝脏损伤指标的ALT和AST高峰都出现在挤压48 h后，反映肾脏损伤指标的K+、BUN和Cr高峰值出现于挤压3h、24h和24h后，反映心脏损伤指标的CK高峰值出现在挤压3h后。以上生化指标提示此模型可为预防、早期诊断及治疗挤压伤综合征提供有意义的参考。

目录

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摘要

英文缩写索引

引言

一、材料与方法

1．1 实验材料

1．1．1 主要试剂

1．1．2 主要仪器

1．2 实验方法

1．2．1 大鼠双下肢挤压伤模具的制备

1．2．2 动物分组

1．2．3 标本收集及检测

1．3 统计学处理

二、结果

2．1 大体观察

2．2 血生化检测

2．3 组织病理学观察

2．3．1 受压处局部肌肉肿胀度改变

2．3．2 受压处局部肌肉的病理学改变

2．3．3 肾组织病理改变

2．3．4 心肌病理学改变

三、讨论

四、展望

参考文献

综述 挤压综合征研究进展

致谢

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