特异性COX-2抑制剂和胃泌素受体拮抗剂对胃癌细胞增殖和凋亡的影响

摘要

目的:近年来研究表明,环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)和胃泌素在肿瘤发生、发展中起十分重要的作用,但特异性COX-2抑制剂和胃泌素受体拮抗剂对胃癌的防治作用及其机制尚未十分明了.本课题研究特异性COX-2抑制剂NS-398和CCK-B/胃泌素受体拮抗剂AG-041R对人胃腺癌细胞系MKN-45增殖、凋亡的影响,旨在明确两种非细胞毒性药物对胃癌有无协同抗癌作用,为临床联合应用特异性COX-2抑制剂和胃泌素受体拮抗剂防治胃癌提供实验依据.方法:MKN-45细胞常规培养于含10％小牛血清的RPMI-1640培养液中,NS-398组(培养液中NS-398终浓度为1×10<'-8>~1×10<'-4>mol/L),AG-041R组(AG-041R终浓度为1×10<'-9>~1×10<'-5>mol/L),联合用药组(NS-398和AG-041R终浓度分别为1×10<'-5>mol/L和1×10<'-6>mol/L),对照组加入等容量的培养液和DMSO.采用四氮唑盐(MTT)比色法观察细胞增殖活力改变,流式细胞仪检测细胞凋亡百分率,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测癌基因c-myc mRNA的表达.结果:1、MTT显示NS-398和AG-041R均在一定范围内呈浓度和时间依赖性地抑制MKN-45细胞的增殖;联合用药组抑制率显著高于单用NS-398或AG-041R(P<0.01),金正均方法提示q>1.15,提示两药联合应用有协同抑制胃癌细胞增殖效应,并随着作用时间延长而增强.2、流式细胞仪测定显示NS-398(1×10<'-5>mol/L)、AG-041R(1×10<'-6>mol/L)和两药联合作用于MKN-45细胞72h后,在G<,0>/G<,1>期均出现一亚二倍体峰,经计算机确认为凋亡峰,3组的细胞凋亡率分别为(9.57±0.60)％、(10.25±0.68)％和(20.83±1.90)％,与对照组相比细胞凋亡率均显著增高(P<0.01),联合用药组细胞凋亡率显著高于单一用药组(P<0.01).3、NS-398、AG-041R及二者联合应用均显著抑制MKN-45细胞c-myc mRNA的表达(P<0.01),联合用药组与单一用药组相比差异有非常显著性意义(P<0.01).结论:NS-398和AG-041R剂量、时间依赖性地抑制MKN-45细胞增殖;促进MKN-45细胞凋亡;抑制癌基因c-myc mRNA的表达.两者联合应用具有协同作用.

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缩略词表

前 言

胃泌素在恶性肿瘤中的作用机制

环氧化酶-2抑制剂与胃癌

材料与方法

结 果

讨 论

结 论

致 谢

参考文献

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