羟基喜树碱诱导人骨髓增生异常综合征MUTZ-1细胞凋亡及机理的研究

摘要

目的:研究羟基喜树碱(HCPT)对人骨髓增生异常综合征(MDS)细胞株MUTZ-1细胞的凋亡诱导作用，探讨药物诱导凋亡的可能机制，并可为临床MDS的治疗提供一定的理论依据。 方法:采用MTT法研究HCPT对MUTZ-1细胞体外生长的抑制作用；流式细胞仪技术分析凋亡细胞量和细胞周期的改变；光镜及透射电镜观察凋亡细胞形态学改变；半定量RT-PCR方法检测生存素基因(Survivin)、B细胞淋巴瘤/白血病基因2（Bcl-2)、B细胞淋巴瘤/白血病基因2相关X蛋白基因（Bax)的mRNA表达水平。 结果:1HCPT可抑制MUTZ-1细胞的生长，不同浓度药物处理对细胞生长的抑制作用之间差别有统计学意义(F=10.24，p＜0.0001)；药物处理不同时间对细胞生长的抑制作用之间差别有统计学意义(F=3.78，p=0.009)。2HCPT可诱导MUTZ-1细胞株凋亡，不同浓度药物处理后，细胞凋亡率之间差别有统计学意义(F=16.35，p＜0.0001)；药物处理不同时间后，细胞凋亡率之间差别有统计学意义(F=57.93，p＜0.0001)。3光镜观察可见凋亡细胞胞体固缩，核固缩，核染色质碎裂。透射电镜观察，可见凋亡细胞核染色质凝聚、边集，部分细胞核膜消失；细胞浆浓缩、密度增加，胞浆内可见大小不规则的染色质团块。4不同浓度HCPT处理24h，与空白对照组比较，S期细胞增多，细胞阻滞于S期(p＜0.05)。5在一定条件下，HCPT处理细胞不同时间后，Bcl-2、Bax基因表达量未见明显变化(p＞0.05)，Survivin基因表达量可见明显下调(p＜0.05)；在一定条件下，不同浓度HCPT处理细胞后，Bcl-2、Bax基因表达量未见明显变化(p＞0.05)，Survivin基因表达量可见下调趋势(p＜0.05)。 结论:HCPT抑制MUTZ-1细胞的生长，呈剂量和时间的依赖性。HCPT可诱导MUTZ-1细胞凋亡，呈剂量和时间依赖性。光镜及透射电镜下可见典型凋亡细胞。HCPT诱导MUTZ-1细胞凋亡过程中可改变细胞周期，使细胞阻滞于S期。HCPT诱导MUTZ-1细胞凋亡过程中，可能与抗凋亡基因Survivin表达下调有关。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：主要缩略语

东南大学学位论文独创性声明及使用授权声明

前 言

文献综述

材料与方法

结 果

讨论

结论

参考文献

致谢

作者简介