谷氨酰胺诱导热休克蛋白在内毒素休克血管低反应性中的作用及可能机制

摘要

第一章谷氨酰胺对正常大鼠热休克蛋白70 mRNA表达的影响目的：观察谷氨酰胺(Glutamine，Gln)是否能够诱导热休克蛋白70mRNA的表达。 方法：1)24只健康雄性SD大鼠随机分为4组(每组n=6)，Ⅰ组，静脉注射生理盐水；Ⅱ组，静脉注射Gln．0.15 g·kg<'-1>Ⅲ组，静脉注射Gln．0.45 g·kg<'-1>：Ⅳ组，静脉注射Gln.0.75g.kg<'-1>。各组大鼠于4h后处死，留取心、肝、肺和主动脉，用RT-PCR法测定HSP70mRNA的表达。2)30只健康雄性SD大鼠静脉注射Gln.0.75 g·kg<'-1>后随机分为5组(每组n=6)，分别在1h(1h组)、6h(6h组)、12h(12h组)、24h(24h组)和48h(48h组)处死，留取心、肝、肺和主动脉，用RT-PCR法测定HSPTOmRNA的表达。 结果：1)各脏器组织中，Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组HSP70mRNA的表达均高于I组(P<0.05)，Gln剂量依赖性导致HSP70mRNA的表达增高(P<0.05)：2)1h组、6h组和12h组HSP70的mRNA表达均高于24h组和48h组(P<0.05)。 结论：Gln能够时间和剂量依赖性诱导大鼠HSPTO的mRNA表达，并且1-12h为表达高峰期。 第二章谷氨酰胺诱导热休克蛋白表达对内毒素休克大鼠血管反应性的影响目的观察注射谷氨酰胺(Glutamine，Gln)诱导热休克蛋白(heat shock protein，HSP)表达对内毒素休克大鼠血管反应性的影响。 方法 24只健康雄性SD大鼠，随机分成空白对照组(n=8)：LPS休克组(LPS[Sigma]10 mg·kg<'-1>iv，n=8)：谷氨酰胺(Gln)治疗组(LPS注射前1h静脉注射Gln 0.75 g·kg<'-1>，n=8)。空白对照组及注射LPS 6 h后各组动物静注去氧肾上腺素(PE，0.5-2.5 μg·kg<'-1>)，记录注药后MAP的增加百分比。所有in vivo实验结束后，取大鼠胸主动脉环做离体张力实验，建立PE的剂量一反应曲线并计算相应的Emax、EC<,50>值。注射LPS后在90 min、360 min测定血清TNF-α、I-6和血浆MDA含量。注射LPS后6 h，留取心脏和主动脉，用免疫组化法测HSP70的表达。结果：静脉注射PE后，L,PS休克组动物MAP的平均增长率与对照组相比显著降低至51.4﹪(P<0.05)：而Gln治疗组MAP对PE反应的增长率较之LPS休克组增高了17.5﹪(P<0.05)。LPS休克组大鼠胸主动脉环对PE的反应(Emax，0.94 g±0.01g；EC<,50>，13.49 nmol/L±0.06 nmol/L)与对照组相比有显著差异(Emax，1.88 g±0.04 g：EC<,50>，8.55 nmol/L±0.08 nmol/L，P<0.05)，Gln治疗组动脉血管的血管反应性有显著改善(p<0.05)。三组动物的心脏、主动脉中均有HSP70的表达，但Gln组的表达量较L,PS休克组显著增加(P<0.05)。Gln治疗组血清TNF-α、IL-6及血浆MDA的水平均显著低于LPS休克组(P<0.05)。结论：谷氨酰胺通过诱导HSP70的表达，减少炎性介质生成和减少体内过氧化物产生，从而改善内毒素休克血管低反应状态，有益于休克与危重症治疗。

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文摘

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绪言

文献综述 谷氨酰胺和热体克蛋白的保护作用及可能机制

第一章谷氨酰胺对正常大鼠热休克蛋白70mRNA表达的影响

材料和方法

结果

讨论

第二章谷氨酰胺诱导热休克蛋白表达对内毒素休克大鼠血管反应性的影响

材料与方法

结果

讨论

结 论

致 谢

参考文献

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