镧系离子（铽）探针荧光光谱法测定外周血DNA的研究

摘要

[目的]评价镧系离子探针荧光光谱法检测外周血DNA荧光强度及浓度的灵敏性及其对恶性肿瘤的筛选价值，并利用其初步判断患者肿瘤的侵袭转移潜能及预后。 [方法]建立镧系离子探针荧光光谱法，通过不同试验条件来确定该方法的最佳激发波长和测定波长、最佳pH值、Tb<'3+>-CIP离子配比、Tb<'3+>-CIP离子浓度及体系的稳定性，建立标准曲线。应用微量基因组抽提试剂盒各提取50例(2004年7月-2006年1月)病理学或骨髓细胞学诊断的恶性实体瘤、白血病、MDS患者及正常人外周血DNA，以镧系离子探针荧光光谱法检测其荧光强度，利用标准曲线来计算各组DNA的浓度。 [结果]成功建立了镧系离子探针荧光光谱法，确定该方法的最佳激发波长和测定波长分别为325nm及545nm、最佳酸度为PH7.0、Tb<'3+>-CIP离子配比[Tb<'3+>]/[CIP]=50、Tb<'3+>、CIP离子浓度分别为10×10<'-5>mol/L、2.0×10<'-6>mol/L及体系放置时间为30min，其线性回归方程为：F<,1>-F<,0>=10<'7>C+48.001 (r-0.998)恶性实体瘤、白血病、MDS、正常人外周血DNA荧光强度分别为：345.645_+28.004、322.988±43.530，308.477±33.834，276.152±29.442。平均浓度分别为：1.65×10<'-6>mol/L，1.16x 10<'-6>mol/L、2.69x 10<'-7>mol/L、9.83×10<'-8>mol/L,三组恶性疾病外周血DNA荧光强度及浓度均明显高于正常人(P<0.001),且三者之间荧光强度及浓度有显著性差异(P<0.05)，恶性实体瘤组最高、白血病次之、MDS最低。初步确定了281.771作为筛选恶性肿瘤荧光强度的临界值。 [结论]镧系离子探针荧光光谱法检测外周血DNA荧光强度变化的灵敏性好，方法简便，且经济效佳，对于恶性肿瘤具有一定的筛选价值，且有可能成为一种新的肿瘤标志物检测方法，有望在肿瘤早期诊断和其它标志物阴性的患者中发挥作用。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩略词表

东南大学学位论文独创性声明及东南大学学位论文使用授权声明

前言

文献综述

实验

讨论

参考文献

结论

作者简介

致谢