应用组织芯片技术研究乳腺浸润性导管癌中Galectin-3、Ezrin、OPN的表达及其临床病理意义

摘要

[目的]： ①制备高通量乳腺病变组织芯片,并探讨其制备方法的技术改进； ②应用组织芯片技术检测Galectin-3、Ezrin、OPN在乳腺浸润性导管癌(invasive ductal carcinoma,IDC)中的表达情况,并探讨其临床病理意义。 [方法]： ①制作包含120例浸润性乳腺癌和40例乳腺良性病变石蜡包埋标本的组织芯片,从受体蜡块用蜡的选择、制备过程中的温度处理、切片方法、载玻片的选择等方面对组织芯片技术进行改进。 ②应用组织芯片技术和免疫组织化学方法研究101例乳腺IDC和37例乳腺良性病变中Galectin-3、Ezrin、OPN的表达情况,并统计分析其与年龄、肿块最大直径、组织学分级、TNM分期、淋巴结转移以及ER、PR、c-erbB-2表达之间的关系。 [结果]： ①制备完成的组织芯片排列整齐,无皱褶、无缺损,保持良好的抗原性,掉片率为0.00％,免疫组织化学染色清晰、无边缘效应。 ②Galectin-3在乳腺IDC中的阳性表达率和表达强度显著高于乳腺良性病变组(均为P=0.000);Ezrin在乳腺IDC和乳腺良性病变中具有明显不同的亚细胞定位,其在91.89％(34/37)的乳腺良性病变中表现为导管上皮内缘顶膜表达,无一例在细胞质表达,在75.25％(76/101)的乳腺IDC中表现为细胞质内弥散表达,无一例顶膜表达,二者差异显著(P=-0.000);OPN在二者中的表达差异无统计学意义。在乳腺IDC组,Galectin-3表达强度与TNM分期(rs=0.269,P=0.007)、是否出现淋巴结转移(rs=0.337,P=0.001)以及淋巴结转移数量(rs=0.304,P=-0.002)均呈正相关,而与年龄、肿瘤最大直径、组织学分级以及肿瘤细胞中ER、PR、c-erbB-2的表达的关系无统计学意义；Ezrin表达与TNM分期(rs=0.334,P=0.001)、肿瘤最大直径(rs=0.277,P=0.005)、淋巴结转移(rs=0.323,P=0.001)均呈正相关,与年龄、组织学分级、淋巴结转移数量、ER、PR、c-erbB-2表达的关系无统计学意义；OPN表达与肿瘤最大直径(rs=0.232,P=0.020)、TNM分期(rs=0.328,P=0.001)、是否出现淋巴结转移(rs=0.399,P=-0.000)以及淋巴结转移数量(rs=0.379,P=0.000)均呈正相关,而与年龄、组织学分级、ER、PR、c-erbB-2表达的关系无统计学意义。Galectin-3表达与Ezrin和OPN的表达均呈正相关(分别为rs=0.360,P=-0.000;rs=0.272,P=0.006);Ezrin与OPN的表达的关系无统计学意义。 [结论]： ①改进的组织芯片制备技术克服了掉片、缺损、抗原性丢失等问题,提高了组织芯片的质量,使组织芯片技术能更好地应用于科研和临床工作之中。 ②Galectin-3表达水平和Ezrin的亚细胞定位在乳腺良、恶性病变中发生了明显的变化,二者的表达情况对乳腺病变性质的判断具有重要价值。Galectin-3、Ezrin、OPN高表达的乳腺IDC具有更高的侵袋性和淋巴结转移能力,对Galectin-3、Ezrin、OPN作用机制的深入研究有可能使其成为乳腺IDC患者个体化治疗的新靶点。

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前言

文献综述 Galectin-3、Ezrin、OPN与肿瘤转移

第一章材料与方法

1.1实验材料

1.1.1标本

1.1.2主要试剂和材料

1.1.3主要仪器

1.2实验方法

1.2.1病理学复验与肿瘤区域标记

1.2.2受体蜡块的制备

1.2.3组织微列阵的设计

1.2.4组织芯蜡块的制备

1.2.5切片和裱片

1.2.6免疫组织化学

1.2.7免疫组织化学的结果评定

1.2.8随访

1.3统计学分析

第二章结果

2.1组织芯片质量

2.2 Galectin-3

2.2.1 Galectin-3在乳腺IDC与乳腺良性病变中的不同表达

2.2.2 Galectin-3与乳腺IDC淋巴结转移等临床病理特征的关系

2.3 Ezfin

2.3.1 Ezrin在乳腺IDC与乳腺良性增生中的不同表达

2.3.2 Ezrin与乳腺IDC淋巴结转移等临床病理特征的关系

2.4 OPN

2.4.1 OPN在乳腺IDC与乳腺良性增生中的表达

2.4.2 OPN与乳腺IDC淋巴结转移等临床病理特征的关系

2.5 Galectin-3、Ezrin、OPN之间的关系

2.6随访

第三章讨论

3.1组织芯片技术

3.2 Galectin-3

3.3 Ezrin

3.4 OPN

3.5 Galectin-3、Ezrin、OPN的相互关系

3.6关于随访

结论

附图

致谢

参考文献

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