小鼠脾源性内皮祖细胞培养及7.0T MR磁标记单细胞成像研究

摘要

第一部分小鼠脾源性内皮祖细胞培养及7.0T MR单细胞成像初探
　　 目的：小鼠脾源性内皮祖细胞体外分离、培养；氧化铁纳米粒子Fe2O3-PLL体外标记细胞，7.0T磁共振对标记单细胞成像。
　　 方法：密度梯度离心法分离脾脏单个核细胞，诱导培养得到EPCs，从免疫化学、荧光染色对细胞特性鉴定；Fe2O3-PLL标记细胞，普鲁士兰染色，MTT法评价Fe2O3-PLL对细胞生长的影响，邻菲哕啉法定量分析细胞内铁含量；7.0T MR不同序列体外单细胞成像。
　　 结果：小鼠脾脏单个核细胞经体外诱导培养呈内皮细胞形态，表达EPCs表面标志物CD31、CD34、vWF，显示内吞乙酰化低密度脂蛋白（acLDL）、结合凝集素1（UEA-1）等内皮细胞的功能；Fe2O3-PLL标记对细胞增殖活力无明显影响；7.0T MR能够对磁标记单细胞成像。
　　 结论：小鼠脾脏单个核细胞可诱导分化为EPCs；7.0T MR能够对Fe2O3-PLL标记EPCs实现体外单细胞成像。
　　 第二部分7.0T MR对磁标记单细胞成像参数探讨
　　 目的：7.0T MR系统对氧化铁纳米粒子标记单细胞进行体外成像，并对成像参数进行探讨。
　　 方法：3D-FLASH序列对磁标记单细胞计数，对比梯度回波序列与自旋回波序列成像差异，对比梯度回波序列不同回波时间、不同分辨率成像差异。
　　 结果：7.0MR能对磁标记单细胞进行成像，MR图像对细胞浓度为2×103/ml的琼脂糖模型进行细胞计数为1.7×103/ml，与实际浓度一致。2D-FLASH较SE序列对磁标记单细胞导致的T2*WI信号改变明显，差异具有统计学意义；3D-FLASH序列随TE时间延长T2*效应增强，但图像伪影逐渐明显；分辨率降低单细胞导致的信号缺失明显降低，在200μm时单细胞导致的信号波动已基本接近琼脂糖背景的内源性波动。
　　 结论：7.0TMR系统可对氧化铁纳米粒子标记的单细胞进行探测，选择适合的序列、优化序列内参数可有效提高磁标记细胞的探测敏感性。
　　 第三部分磁标记单细胞在肝脏分布的MR观察--对内皮祖细胞移植治疗小鼠颈动脉损伤研究的深入思考
　　 目的：氧化铁纳米粒子Fe2O3-PLL，体外标记小鼠脾源性内皮祖细胞，经尾静脉移植至受体鼠内，7.0T MR对小鼠肝脏行离体成像。
　　 方法：分离、诱导培养小鼠脾脏单个核细胞，Fe2O3-PLL标记细胞；制作小鼠颈动脉损伤模型，并移植标记细胞：动态监测受损颈动脉内膜改变，7.0TMR对小鼠肝脏行离体高分辨成像，并做病理切片观察。
　　 结果：7.0T MR能动态观察到细胞向动脉内膜损伤部位归巢；7.0TMR.能够对定植于肝脏的磁标记单细胞成像。
　　 结论：7.0T MR能够动态监测磁标记细胞活体的迁移、归巢，单细胞成像在细胞移植治疗的研究中具有极大的前景。

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前言

参考文献

文献综述

参考文献

第一部分

材料方法

结果

讨论

参考文献

第二部分

材料方法

结果

讨论

参考文献

第三部分

材料方法

结果

讨论

参考文献

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