刺梨与金荞麦提取物体外干预人食管癌细胞株CaEs-17增殖和凋亡的初步研究

摘要

目的：
　　 探讨体外环境下，刺梨提取物CL、金荞麦提取物FR以及两药联合应用对人食管癌细胞株CaEs-17增殖及凋亡的影响及其意义。
　　 方法：
　　 MTT法检测刺梨提取物CL、金荞麦提取物FR以及联合用药作用不同时间（24h、48和72h）后CaEs-17细胞的增殖抑制率；利用倒置荧光显微镜观察CL、FR单药及联合用药作用24h后细胞凋亡形态；流式细胞术检测CL、FR单药及联合用药干预24h后CaEs-17细胞周期的变化和诱导CaEs-17早期凋亡细胞比例；采用RT-PCR和Western blot法分析CL、FR单药及联合用药作用24h后Ki-67 mRNA（蛋白）、Bax mRNA（蛋白）和Bcl-2 mRNA（蛋白）表达的变化。
　　 结果：
　　 MTT法结果显示CL单药在（7.5-240μg/ml）区间内时，增殖抑制率在（3.09±0.40）％至（52.06±1.97）％区间内随着药物浓度和作用时间升高而增大、FR单药在（10-320μg/ml）区间内时，增殖抑制率在（2.94±0.31）％至（49.72±1.82）％区间内随着浓度和作用时间升高而增大，呈剂量依赖性和时间依赖性；同时在此区间内两者联合应用时具有协同效应。在倒置荧光显微镜下，对照组、IC30 CL组、IC30 FR组、1/2（IC30 CL+IC30 FR）联合用药组分别作用CaEs-17细胞24h后，可见联合组中早期凋亡细胞较对照组、单药组明显增多。流式细胞术结果显示对照组、IC30 CL组、IC30 FR组、1/2（IC30 CL+IC30 FR）联合用药组分别作用24h后，CaEs-17细胞早期凋亡比率分别为（3.57±0.23）％、（23.75±1.39）％、（21.52±1.21）％、（37.57±1.75）％，两单药组与联合组之间差异均有统计学意义；同时，流式细胞术检测细胞周期结果显示：与对照组和单药组相比，联合组中CaEs-17细胞阻滞在G0/G1期比例增多为（78.50±3.94）％，G2/M期比例（3.21±0.85）％明显减少，差异具有统计学意义。RT-PCR和Western blot结果显示：对照组、IC30 CL组、IC30 FR组、1/2（IC30 CL+IC30 FR）联合用药组分别作用CaEs-17细胞24h后，与对照组和单药组比较，联合组中Ki-67、Bcl-2 mRNA和蛋白表达显著降低，而Bax mRNA和蛋白表达显著增高，差异具有统计学意义。
　　 结论：
　　 刺梨提取物CL、金荞麦提取物FR均可抑制人食管癌细胞株CaEs-17的增殖和诱导其凋亡，二者联合协同作用存在。两者抑制CaEs-17细胞增殖的机制可能与下调Ki67的表达相关，其促进CaEs-17细胞凋亡的机制可能与下调Bcl-2和上调Bax表达相关。

目录

文摘

英文文摘

缩略词表

前言

第一章 文献综述

第二章 实验材料和方法

第三章 结果

第四章 讨论

结论

存在问题和展望

参考文献

作者简介以及在校期间发表论文情况

致谢