TritonX-100诱导的嗅觉障碍大鼠嗅球的组织学研究及β-Netrin mRNA的表达

摘要

目的：
　　 1、建立化学损伤诱导的嗅觉障碍大鼠模型，用行为学方法观察其嗅觉变化。
　　 2、观察嗅觉恢复过程中大鼠嗅粘膜和嗅球的组织学变化。
　　 3、检查嗅觉恢复过程中β-Netrin mRNA在大鼠嗅球中的表达变化。
　　 方法：40只出生40d的健康SD大鼠经行为学检查训练后，随机取30只以TritonX-100进行造模，造模后次日进行行为学检查，共获得24只造模成功的大鼠，将其归为M组，另10只大鼠用生理盐水进行假造模，作为对照组。所有大鼠以每6d为一轮，进行行为学检查。于30d、45d随机选择8只M组大鼠处死取材，于60d时处死对照组及剩余8只M组大鼠，分别取嗅粘膜和嗅球进行进一步检查。嗅粘膜进行HE染色，嗅球则做电镜和原位杂交检验。
　　 结果：
　　 1、行为学检查：两种行为学方法，双瓶实验(TBE)，埋藏食物小球实验(BFPT)均提示大鼠嗅觉逐渐恢复。
　　 2、嗅粘膜和嗅球的组织学检查显示TritonX-100对嗅粘膜全层均有极大损伤，但损伤可以恢复。嗅球会受到继发性损伤，可见线粒体增多，大小不一，线粒体嵴部分缺失，其他细胞器减少。细胞膜部分损伤，胞内可见空泡及坏死细胞碎片，细胞连接欠紧密，细胞间隙增宽。
　　 3、原位杂交显示：30d和45d组均可见中等阳性和强阳性信号成串排列，对照组和60d组可见中等阳性和弱阳性信号散在排列。评分示：对照组得分为3.0±0，30d组为4.75±0.5，45d组为6.5±0.577，60d组为4.25±0.5。经单因素方差分析法计算各相邻组间结果有统计学差异。
　　 结论：
　　 1、TritonX-100鼻腔灌注可引发大鼠嗅觉丧失。TBE及BFPT检查确切有效。
　　 2、嗅觉、嗅粘膜和嗅球的病理改变均可恢复。
　　 3、β-Netrin mRNA在大鼠嗅球中的表达随着大鼠嗅觉功能的恢复有一定的变化，表现为阳性信号成串排列且信号增强，其中造模后45d左右较强，提示β-Netrin可能在嗅觉恢复过程中起到一定的作用。