纳米二氧化锰激活DMT1高表达诱导多巴胺能神经元凋亡

摘要

目的:探讨纳米二氧化锰（nano-MnO2）对多巴胺能神经元(DNs)的损伤作用及其机制。
　　方法:采用不同浓度(0、0.25、0.5、1、2、4μmol/ml)的nano-MnO2-10nm对Cath.a细胞（多巴胺能细胞系）染毒24h，用四唑盐(MTT)比色法检测细胞的活性，流式细胞术检测细胞的凋亡率，免疫荧光双标法检测caspase3和酪氨酸羟化酶(TH)的表达，用Western Blot检测二价金属离子转运体(DMT1)的表达。
　　结果:MTT检测显示:nano-MnO2对Cath.a细胞增殖有抑制作用(P＜0.01)，并且抑制率随着nano-MnO2浓度的增加而升高;流式细胞仪检测显示:实验组与对照组相比均能够显著引起Cath.a细胞的凋亡(P＜0.01)，其凋亡率随着nano-MnO2浓度的增加而升高;荧光显微镜下可见:实验组大部分Cath.a细胞呈TH阳性和caspase3阳性共表达，对照组则很少有caspase3阳性表达;Western blot检测显示:DMT1的表达量与对照组相比除0.25umol/mlnano-MnO2组外，DMT1的表达量均显著上升（P＜0.01），且有随着nano-MnO2浓度增高DMT1表达量亦随之升高的趋势。
　　结论:我们的实验结果证实了nano-MnO2-10nm对DNs亦具有毒性损伤作用，促使DNs凋亡，并呈现浓度依赖性趋势，其可能与DMT1高表达致使DNs内nano-MnO2蓄积有关。

目录

声明

摘要

缩略词

前言

文献综述

材料和方法

1．材料

2．方法

结果

1 nano-MnO2抑制Cath．a细胞的增殖

2．nano-MnO2对Cath．a细胞凋亡的影响

3．nano-MnO2诱导Cath．a细胞表达DMT1

讨论

1 用于脑研究细胞系的选择

2 纳米材料对细胞活性的影响

3 纳米材料对细胞凋亡的影响

4 DMT1在nano-MnO2损伤DNs中的作用

5 影响DMT1表达的可能机制

6 锰中毒和PD

7 本研究存在的不足以及有待进一步研究的问题

参考文献

结论

致谢

作者简介