抗VEGF单克隆抗体BD0801单药及联合5-FU体外抑制HCC细胞SMMC-7721增殖及抗血管生成作用的研究

摘要

目的：
　　研究抗VEGF单克隆抗体BD0801单药或联合氟尿嘧啶(5-Fu)体外对人肝细胞癌(HCC)细胞SMMC-7721增殖的影响及抗血管生成作用，并初步探讨其作用机制。
　　方法：
　　以人HCC细胞SMMC-7721和人脐静脉血管内皮细胞EAhy926为实验对象，设立阴性对照组（未加药组）、阳性对照组[贝伐珠单抗(Bev)单药组、5-Fu单药组、Bev+5-Fu组]和实验组（BD0801单药组、BD0801+5-Fu组）。应用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)测定细胞增殖抑制率;流式细胞术分析细胞凋亡率和细胞周期变化;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞培养液中VEGF水平变化;蛋白印迹法(Western Blot)检测细胞VEGF、pVEGFR蛋白表达水平，体外细胞划痕实验、Transwell共培养系统检测对EAhy926细胞迁移的影响，小管成形试验检测对内皮细胞管化能力的影响。
　　结果：
　　1、BD0801通过抑制VEGF/VEGFR通路活性而抑制SMMC-7721和EAhy926细胞增殖，且能有效诱导两株细胞凋亡、阻滞细胞周期。BD0801能降低两株细胞培养液中VEGF水平、并对EAhy926细胞迁移及管腔形成能力有一定抑制作用。
　　2、与单药作用比较，BD0801联合5-Fu可显著增强抑制SMMC-7721和EAhy926细胞增殖及诱导细胞凋亡作用，使G0/G1期细胞比例上升，并增强抑制VEGF/VEGFR通路活性作用，并可增强抑制EAhy926迁移及管腔形成。
　　3、与Bev单药或联合5-Fu相比，BD0801单药或联合5-Fu能更有效地抑制SMMC-7721和EAhy926细胞增殖、诱导细胞凋亡及抑制VEGF/VEGFR通路活性，并能更有效地抑制EAhy926迁移和管化能力。
　　结论：
　　BD0801体外通过靶向VEGF/VEGFR路径抑制HCC细胞SMMC-7721和内皮细胞EAhy926生长、诱导细胞凋亡、阻滞细胞周期，并能抑制EAhy926细胞迁移和管化。与单药作用相比，BD0801联合细胞毒药物5-Fu体外通过靶向VEGF/VEGFR路径增强抑制SMMC-7721和EAhy926细胞生长、诱导细胞凋亡、阻滞细胞周期，并能增强抑制EAhy926细胞迁移和管化形成。与Bev相比，BD0801的上述生物学效应更强。提示BD0801有可能是一个有效的抗VEGF单克隆抗体，值得进一步深入研究其治疗HCC的可能性。

目录

声明

摘要

缩略词表

前言

第一章 文献综述 抗VEGFR单克隆抗体治疗恶性肿瘤的临床研究进展

第二章 实验材料和细胞培养

1、实验材料

2、细胞培养

第三章 BD0801单药体外抑制HCC细胞株SMMC-7721增殖及抗血管生成作用的研究

1、实验方法

3．2、结果

第四章 BD0801联合5-Fu体外抑制HCC细胞SMMC-7721增殖和抗血管生成作用的研究

1 实验方法

2．结果

第五章 讨论

第六章 结论

参考文献

致谢

个人简介

攻读硕士学位期间发表论文