颈交感神经阻断对β-氨基丙腈诱导大鼠主动脉夹层形成的影响和机制探讨

摘要

本文从以下几个部分展开论述： 第一部分 大鼠主动脉夹层模型构建和β-氨基丙腈对大鼠交感神经活性影响的研究 背景：主动脉夹层（AD）是最常见的主动脉急症之一，具有极高的病死率和并发症发生率。临床研究显示人体交感神经活性(SNA)增加可能与AD的发生相关。然而由于缺乏合适的动物模型，相关机制研究仍十分少见。β-氨基丙腈（BAPN）是一种广泛用于制造大鼠AD模型的药物，其作用机制在于阻止主动脉壁胶原和弹性纤维交联形成，最终导致AD发生。BAPN诱导的AD病理特点为血管中膜的退化和弹性纤维的碎裂，这种病理改变和人类患者相似。我们推测大鼠在AD形成过程中也伴随SNA的增强。目前采用BAPN诱导大鼠AD模型的方法较多，最常用的包括皮下给药和口服给药两种方式，且不同给药浓度或给药途径造模成功率及大鼠存活率也不同。 目的：本研究旨在观察几种BAPN诱导大鼠AD模型常用方法，比较它们的造模成功率及大鼠存活率，筛选出最合适的造模方式，同时观察BAPN给药对大鼠SNA的影响。 方法：急性实验中，选取10只Sprague–Dawley（SD）大鼠，8周龄，体重约300g，随机分为实验组和对照组。实验组大鼠腹腔注射BAPN666mg/kg1小时后，直接测量其肾交感神经活性（RSNA），评估BAPN给药对大鼠SNA的短期影响。慢性试验中，另选取35只3周龄，体重约50g SD大鼠，根据不同的给药浓度和方式随机分为4组，分别为Ⅰ组：0.1%BAPN口服；Ⅱ组：0.25%BAPN口服；Ⅲ组：666mg/kg/d BAPN皮下注射以及Ⅳ组：对照组。我们对三种给药方式进行比较，观察AD造模成功率及大鼠存活率，并选择造模成功率及存活率最高组的大鼠行进一步研究。通过无创尾动脉血压测量装置评估药物干预对大鼠的平均动脉压（MAP）及心率（HR）的影响。采用麻醉状态下静脉注射交感神经节阻断剂六甲溴铵来间接评估大鼠整体SNA的改变。采用组织染色观察大鼠主动脉血管形态的改变。 结果：急性实验中，BAPN给药1小时后成年大鼠RSNA检测水平显著高于对照组。慢性实验中，至4周造模结束时，四组大鼠平均体重分别为200.5±21.9g、101.8±32.6g、114.1±39.1g和262.2±8.1g。其中3组大鼠药物干预4周后存活率分别为80%、50%、80%，AD造模成功率（包括因主动脉破裂死亡的大鼠）分别为20%、60%、70%。采用666mg/kg/d BAPN皮下注射的方式造模，大鼠AD形成率和成活率最高。SNA间接检测结果显示，经过4周BAPN给药大鼠SNA相较对照组也有显著提高。 结论：我们的研究初步表明，通过666mg/kg/d BAPN皮下注射给药是一种有效的大鼠AD造模手段，腹腔注射BAPN后短期内大鼠SNA即出现显著增强，BAPN药物诱导AD形成的大鼠也出现SNA的明显升高，该模型可用于SNA与AD发生发展之间关系的研究。 第二部分 双侧颈上交感神经节阻断对β-氨基丙腈诱导的大鼠主动脉夹层形成的影响 背景：主动脉夹层（AD）病因复杂，至今发病机制仍未完全阐明。AD的发生过程通常是血管内膜出现撕裂，随后进展为血管中膜退化和囊性中膜坏死。交感神经系统（SNS）对心血管系统功能的调节起到重要作用，而交感神经节阻滞（SGB）也已经被证实可以减轻和缓解多种心血管疾病，包括房颤及肺动脉高压等。一些临床研究显示SNS可能参与AD的发病过程，由于缺乏合适的动物模型，相关研究仍十分少见。我们前期研究发现通过β-氨基丙腈（BAPN）诱导的AD模型大鼠，其交感神经活性（SNA）也出现显著增强。我们推测通过手术操作阻断交感神经可能延缓或阻碍AD的发生和进展过程。 目的：本研究旨在观察双侧颈上交感神经节阻断（SCGx）对BAPN诱导的大鼠AD形成的影响。 方法：选取40只Sprague–Dawley（SD）大鼠，随机分为3组，分别为单纯BAPN造模组（BAPN n=15），BAPN造模联合双侧颈上交感神经节阻断组（BAPN+SCGx n=15)，以及空白对照组(n=10)，观察AD造模成功率及大鼠存活率。BAPN药物造模采用666mg/kg/d BAPN皮下注射给药，实验总计4周。4周后通过无创尾动脉血压测量装置评估手术及药物干预对大鼠的动脉血压（ABP）及心率（HR）的影响。采用麻醉状态下静脉注射交感神经节阻断剂六甲溴铵来间接评估大鼠整体SNA的改变，利用组织染色观察大鼠主动脉血管形态的改变。采用western blot方式检测主动脉壁内基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和MMP-9的含量。 结果：实验结果显示BAPN药物可有效诱导AD形成（67.7%），增强大鼠SNA水平。而SCGx手术处理后大鼠SNA的增加被抑制，造模大鼠AD发生率显著降低（20%）。三组大鼠血压无明显差异，但BAPN组心率明显高于BAPN+SCGx组。病理结果显示SCGx显著减轻了BAPN给药大鼠主动脉结构的退化和破坏。BAPN处理后主动脉壁中MMP-2和MMP-9含量相较对照组显著增加，而SCGx显著抑制了管壁中MMP-9含量的增加。 结论：我们的研究初步表明，SCGx可有效的降低BAPN造模大鼠AD的发生率，其机制可能通过降低SNA，抑制了HR的增加和MMP-9的表达，继而减轻和延缓了主动脉的病理改变过程。

目录

第一个书签之前