HGF诱导EGFR突变型及野生型非小细胞肺癌细胞株对厄洛替尼耐药及机制的研究

摘要

目的：肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)受体(c-Met)可能与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC）对厄罗替尼耐药有关。本研究旨在体外研究HGF诱导EGFR突变型及野生型NSCLC细胞对厄罗替尼耐药及可能的耐药机制。
　　方法：选择EGFR突变型及野生型NSCLC细胞(PC9、A549)。实验分为四组：C组(control)、H组(HGF)、E组(erlotinib)、HE组(HGF+erlotinib)。用HGF诱导或(和)厄罗替尼处理细胞，通过MTT法检测细胞增殖，PI法检测细胞周期，Annexin V-FITC法检测细胞凋亡，Western blotting检测细胞中c-Met、EGFR、ErbB3及其磷酸化蛋白的表达。
　　结果：厄罗替尼对这两种细胞的生长抑制作用均呈浓度依赖性，厄罗替尼对HGF诱导的药物-存活率曲线明显往右移。在每种细胞分组中，HE组凋亡率均比E组减少(P<0.05)。在A549细胞中，HE组与E组比较，G0/G1期比例减少(P<0.05)、S期比例增多(P<0.05)。HGF能活化这两种细胞中p-Met蛋白。在这两种细胞中，HE组与E组比较，p-Met蛋白含量则明显升高，p-EGFR、p-ErbB3蛋白含量无明显差异。
　　结论：在体外HGF诱导EGFR突变型及野生型NSCLC细胞株对厄罗替尼耐药，c-Met磷酸化活化可能是HGF诱导NSCLC细胞株对厄罗替尼耐药的重要机制。

目录

声明

中英文对照及缩略语

第一章 前言

第二章 实验材料及方法

2.1 实验材料

2.2 实验方法

2.3 统计学分析

第三章 结果

3.1 HGF刺激不同时间段c-Met的变化

3.2 厄罗替尼或/和HGF处理的药物浓度-生长曲线

3.3 HGF诱导耐药对细胞凋亡晚期的影响

3.4 HGF诱导耐药对细胞周期的影响

3.5 HGF诱导耐药对c-Met及EGFR、ErbB3蛋白的影响

第四章 讨论

结论

参考文献

致谢

综述:非小细胞肺癌对EGFR-TKI获得性耐药的研究分析