厄洛替尼联合氯喹对EGFR野生型非小细胞肺癌增殖、凋亡及自噬相关蛋白表达的影响

摘要

目的 观察厄洛替尼联合氯喹对表皮生长因子受体(EGFR)野生型非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、凋亡及自噬相关蛋白表达的影响.方法 体外培养K-RAS野生型EGFR野生型NSCLC细胞Spc-A1和K-RAS突变型EGFR野生型NSCLC细胞A549,将其分别分为4组,A、B、C组分别加入厄洛替尼、氯喹、厄洛替尼+氯喹各0.1 mL,D组加入等量培养基.培养72 h,采用MTT法观察细胞增殖情况,并计算厄洛替尼、氯喹的联合指数(CI);培养48 h,采用Hoechst33258染色法观察细胞凋亡情况,Western blotting法检测细胞中的自噬微管相关蛋白轻链3(LC3).结果 A、B、C组细胞存活率均较D组降低(P均<0.05),C组细胞存活率较A、B组降低(P均<0.05),厄洛替尼、氯喹两药联用的CI<1.Spc-A1细胞A、B、C组细胞凋亡率分别为21.1％、12.1％、48.9％,高于D组的8.3％(P均<0.05),A549细胞A、B、C组细胞凋亡率分别为19.3％、13.4％、51.5％,高于D组的10.2％(P均<0.05),两种细胞的C组细胞凋亡率均高于A、B组(P均<0.05);A、B、C组细胞自噬相关蛋白LC3-Ⅰ表达减少而LC3-Ⅱ表达增多(P均<0.05),C组较A、B组细胞自噬相关蛋白LC3-Ⅰ表达减少而LC3-Ⅱ表达增多(P均<0.05).结论 氯喹可增敏厄洛替尼对EGFR野生型NSCLC细胞增殖的抑制作用,且增敏不受K-RAS基因表型限制;其机制可能与氯喹阻断细胞自噬和促进细胞凋亡有关.