坚果中还原型谷胱甘肽(GSH)和蛋白巯基(P-SH)含量的测定

摘要

概述了坚果中含有的营养成分和现阶段对坚果的研究情况，介绍了细胞内巯基化合物在生物体内的重要作用及其常用的分析检测方法，并提出坚果中谷胱甘肽等含半胱氨酸残基的巯基化合物的测定方法及其研究的重要意义，概述了本研究的选题思路和主要研究内容。
　　HPLC法测定四种食用坚果种子中还原型谷胱甘肽(GSH)和蛋白巯基(P-SH)含量
　　用5，5'-二硫双-2-硝基苯甲酸(DTNB)为柱前衍生化试剂，在细胞超声破壁的同时立即与衍生化试剂反应，做到同步提取，HPLC梯度洗脱法测定了开心果、巴旦木、澳洲坚果、腰果干品中谷胱甘肽(GSH)和含半胱氨酸残基的蛋白巯基(P-SH)含量。结果发现四种坚果均含较丰富的GSH和P-SH巯基，其含量分别为，开心果:GSH=1.2303μmol/g，P-SH=3.5414μmol/g，巴旦木:GSH=0.3069μmol/g，P-SH=1.9541μmol/g，澳洲坚果:GSH=1.5708μmol/g，P-SH=0.5905μmol/g，腰果:GSH=0.3373μmol/g，P-SH=2.2458μmol/g。在优化的选定条件下，测定方法的回收率为99.37％～101.45％，GSH和P-SH测定检测限分别为0.1386μmol/g和0.2184μmol/g。本研究对坚果活性成分的构成及其巯基化合物在保健防病作用研究及其功能性食品开发均提供了有用的参考数据。
　　光谱法测定四种食用坚果种子中谷胱甘肽(GSH)和总巯基(-SH)的含量
　　利用邻苯二甲醛(OPA)和5，5'-二硫双-2-硝基苯甲酸(DTNB)为衍生化试剂，通过荧光光谱法和UV-vis吸收光谱法，测定了坚果中还原型谷胱甘肽(GSH)和总巯基(-SH)的含量。测定结果表明:坚果中富含GSH和总巯基，开心果GSH=1.0847μmol/g、-SH=5.0001μmol/g澳洲坚果GSH=1.4720μmol/g、-SH=2.4774μmol/g，腰果GSH=0.3255μmol/g、-SH=2.9302μmol/g，巴旦木 GSH=0.2890μmol/g、-SH=2.7627μmol/g。回收率范围为99.72％～100.90％和98.66％～100.75％。
　　坚果中可能的共存组分对测定的影响
　　探究了坚果中的维生素、氨基酸、不饱和脂肪酸等其他活性营养物质对本研究中还原型谷胱甘肽(GSH)和总巯基(-SH)测定的影响。测定结果表明在光谱法测定中较高浓度的维生素和不饱和脂肪酸可能会对结果产生一定的影响，导致总巯基的含量测定结果偏高，而色谱法测定中加入的干扰物质对谷胱甘肽和总巯基含量的测定基本无影响。

目录

声明

摘要

第一章 绪论

1．1 谷胱甘肽的分析检测方法

1．2 本文的选题思想及主要研究内容

第二章 HPLC法测定四种食用坚果种子中还原型谷胱甘肽(GSH)和蛋白巯基(P-SH)含量

2．1 引言

2．2 实验部分

2．3 结果与讨论

2．4 结论

第三章 光谱法测定四种食用坚果种子中谷胱甘肽(GSH)总巯基(-SH)的含量

3．1 引言

3．2 实验部分

3．3 结果与讨论

3．4 结论

4．1 引言

4．2 实验部分

4．3 结果与讨论

4．4 结论

结论

参考文献

致谢