虎杖苷对油酸诱导的大鼠急性呼吸窘迫综合征的影响

摘要

目的:
　　探讨虎杖苷(PD)对油酸(OA)所致大鼠急性呼吸窘迫综合征的保护作用及其作用机制。
　　方法:
　　选取体重180-220g的雄性SD大鼠30只，随机分为5组:对照组(control组)，OA+生理盐水组（模型组），OA+PD15mg/kg组(OA+PDs)，OA+PD30mg/kg组(OA+PDM)，OA+PD45mg/kg组(OA+PDL)，每组6只。采用股静脉注射OA（100μl/kg）制备急性呼吸窘迫征模型，对照组大鼠经股静脉给予等体积生理盐水。注射3小时后处死大鼠。测定肺泡灌洗液内中性粒细胞数量、蛋白质浓度、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)水平。WesternBlotting评估肺组织中Na+/K+-ATPaseα1、Na+/K+-ATPaseβ1、Bax、Bcl-2、Caspase-3、NF-κB-p65、磷酸化p38(p-p38)、磷酸化JNK1/2/3(p-JNK1/2/3)、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)及磷酸化PI3Kp85/p55(p-PI3K)的表达。测定肺湿干比值(W/D)，HE染色观察肺组织病理变化，进行肺损伤评分，免疫组化评定肺组织NF-κB-p65的表达。
　　结果:
　　1.模型组大鼠肺组织肺损伤明显(P＜0.01)，虎杖苷30mg/kg、45mg/kg治疗组的肺组织损伤则显著减轻，具有更低的肺损伤评分及肺W/D比值(P＜0.05)。
　　2.OA诱导增加了泡灌洗液中PMNs和总蛋白含量(P＜0.01)，与对照组比较有显著性差异，而中，大剂量PD组PMNs和总蛋白含量则显著降低(P＜0.05)。
　　3.ELISA结果显示PD抑制OA诱导的ARDS大鼠肺局部炎反应因子，且呈剂量依赖性(P＜0.05)。
　　4.中、大剂量PD显著地逆转了OA对NKA蛋白的抑制作用，增加了ARDS大鼠肺中NKA的表达（P＜0.05）。
　　5.与对照组相比，OA处理后Caspase-3，Bax的表达水平显著增高，而Bcl-2水平降低(P＜0.01)。但PD治疗可明显下调Caspase-3，Bax的表达，上调Bcl-2的表达，高剂量（45mg/kg）PD治疗具有最显著效果(P＜0.05)。
　　6.此外，虎杖苷(30、45mg/kg)处理可逆转油酸引起的ARDS大鼠肺组织中MAPKs、PI3K和NF-κB-p65的表达(P＜0.05)。
　　结论:
　　1.虎杖苷成剂量依赖性抑制炎症反应、减轻肺水肿及抗细胞凋亡。
　　2.虎杖苷可能通过MAPKs/NF-κB或PI3K/NF-κB信号通路发挥对油酸诱导的大鼠急性肺损伤的保护作用。

目录

声明

摘要

缩写对照表

第一章 引言

2．1 实验动物

2．2 药物和试剂

2．3 主要仪器设备

2．4 实验方法

2．4．1 动物分组及给药途径

2．4．2 支气管肺泡灌洗液(BALF)收集及细胞计数、蛋白测定

2．4．3 ELISA测定

2．4．4 Western blotting

2．4．5 病理学检测

2．4．6 湿／干(W／D)比值测定

2．4．7 统计分析

第三章 实验结果

3．1 BALF中的细胞计数和总蛋白质水平

3．2 各组大鼠肺组织的炎症因子

3．3 各组大鼠肺组织NKA的表达

3．4 各组大鼠肺组织的病理学改变

3．5 各组大鼠肺组织的细胞凋亡

3．6 PD调节OA诱导的大鼠中NF-κB-p65、MAPKs和PI3K的表达

第四章 讨论

第五章 结论

参考文献

致谢

[综述]急性呼吸窘迫综合征的治疗进展

附录